RT-cDNA克隆-PCR法获取犬瘟热病毒融合蛋白基因(F) |
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作者姓名: | 江国托 卢景良 刘长明 阎庆生 刘思国 刘滨东 |
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作者单位: | 哈尔滨兽医生物技术国家重点实险室 |
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摘 要: | 纯化鸡胚成纤维细胞培养的犬瘟热病毒(CanineDistemperVirus,CDV),获得病毒基因组RNA后,反转录合成双链病毒F基因cDNA。将此双链cDNA平端插入PUC19质粒SamⅠ位点构建重组质粒,进行cDNA克隆。以重组克隆质粒为模板PCR扩增,获得CDV全长F基因。将此F基因插入表达载体PBV220,在大肠杆菌中表达,通过对表达产物的最终鉴定,可确认所获片段为CDV全长F基因.
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关 键 词: | 犬瘟热病毒融合蛋白基因(F);RT(反转录);cDNA克隆;PCR |
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