| 地高辛精标记酪氨酸羟化酶RNA探针的制备研究 |
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| 引用本文： | 李淑婷,杨慧,鲁瑛,孙阳,田竟生,徐群渊. 地高辛精标记酪氨酸羟化酶RNA探针的制备研究[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志, 1996, 0(4) |
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| 作者姓名： | 李淑婷 杨慧 鲁瑛 孙阳 田竟生 徐群渊 |
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| 作者单位： | 首都医科大学，北京神经科学研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,北京市自然科学基金,北京市科委854670100资助 |
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| 摘 要： | 为制备用地高辛精（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，Ｄｉｇ）标记的酶氨酸羟化酶（ＴｙｒｏｓｉｎｅＨｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ，ＴＨ）ＲＮＡ探针，本研究用分子生物学技术重组质粒ＰＧＥＭＴＨＩ，即分别将携带Ｔ７和Ｓｐ６启动子的ＰＧＥＭ－３ｚｆ质粒和携带ＴＨ基因的ＰＫＳＴＨ质粒用限制性内切酶消化并行分离纯化，得到带Ｔ７和ｓｐ６启动子的ＤＮＡ片段和ＴＨ基因片段；经Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接后转入大肠杆菌，得到ｐＧＥＭＴＨ１重组克隆。经小量提取质粒井用酶切分析检测，证实其确有ＴＨ基因且方向正确。将此质粒再经限制性内切酶消化则得到线状ＤＮＡ片段，用Ｔ７ＲＮＡ聚合酶转录合成带有Ｄｉｇ标记的高比活度的单链ＲＮＡ探针；经斑点杂交试验证实该探针具有较高的可靠性。这将为基因治疗帕金森氏病动物模型的疗效检测提供有效手段。
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| 关 键 词： | 酪氨酸羟化酶，pGEMTH1质粒，地高辛精标记RNA探针，斑点杂交 |
A STUDY ON PREPAPATION OF DIGOXIGENIN LABELED TYROSINE HYDROXYLASE-RNA PROBE |
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| Li shuting, Yang Hut, Lu Ying, Sun Yang et al. A STUDY ON PREPAPATION OF DIGOXIGENIN LABELED TYROSINE HYDROXYLASE-RNA PROBE[J]. Chinese Journal of Histochemistry and Cytochemistry, 1996, 0(4) |
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| Authors: | Li shuting Yang Hut Lu Ying Sun Yang et al |
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| Keywords: | Tyrosine hydroxylase pGEMTH1 Dig-labelled RNA probes Dot blothybridization |
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