改良FIASCO方法筛选砷超富集植物蜈蚣草SSR分子标记 |
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作者姓名: | 李磊, 敖日格乐, 王玢琪, 葛台明 |
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作者单位: | [1]中国地质大学湿地演化与生态恢复湖北省重点实验室,武汉430074; [2]中国地质大学武汉环境学院,武汉430074 |
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基金项目: | 国家自然科学基金重点项目(40930210) |
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摘 要: | 蜈蚣草(Pteris vittata L.)是目前用于砷污染土壤修复最好的超富集植物,但其分子水平上的研究数据较少。为了开发蜈蚣草特异性SSR遗传标记,本文采用改良的FIASCO方法从蜈蚣草AG和AC微卫星富集文库中随机挑选100个克隆,分离得到51个微卫星位点,其中60%为完美型(Perfect)SSR。根据这些位点设计、合成了25对引物,并对江西庐山及湖北恩施两地蜈蚣草种群各20个个体进行了遗传多样性检测,结果发现:其中8个完美型及1个间断型(intermittent)SSR位点的引物能够扩增出清晰、稳定且具有多态性的条带。9对引物共扩增出41个等位基因,各位点等位基因数在2~7之间,平均等位基因数为4.56个;期望杂合度在0.0494~0.8169之间;没有连锁不平衡现象发生。采用大叶井栏边草(Pteris multifida Poir.)进行跨种扩增,结果发现其中6对引物能够进行种间扩增。这些SSR分子标记的开发有助于蜈蚣草生态适应性进化分析、揭示蜈蚣草地理分布格局以及探讨蜈蚣草遗传多样性,还可用于品种鉴定及选育等。
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关 键 词: | 蜈蚣草 微卫星 多态性 FIASCO CviQI接头 pig-tail CviQI-N引物 |
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