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玉米内州萎蔫病菌免疫学检测方法的建立
作者姓名:吴晓巍  金涌  田世民  董金皋  张洋  柳青松  李娇
作者单位:1. 河北农业大学植物保护学院,河北保定,071001;中国检科院综合检测中心,北京,100123
2. 中国检科院综合检测中心,北京,100123
3. 河北农业大学植物保护学院,河北保定,071001
4. 河北大学,河北保定,071002
基金项目:国家科技支撑计划课题(No. 2006BAF07B01); 质检总局科研计划课题(No. 2008IK249); 中国检科院基本科研业务费专项资金资助项目(No. 2008Jk017)
摘    要:以玉米内州萎蔫病菌单抗(4H4和4G12)为基础,纯化抗体后,进行亚类鉴定、效价及特异性测定。比较间接ELISA和双单抗夹心ELISA(DAS-ELISA)的检测灵敏度,并应用于玉米种子中萎蔫病菌的检测。结果表明,两株单克隆抗体(0.4g/L)效价均可达1:256000,亚类鉴定结果分别为IgG2a和IgG2b,轻链均为K链。与供试的16株非目标细菌均无交叉反应。DAS-ELISA对萎蔫病菌种子悬浮液的检测灵敏度为1.0×109CFU/L,在此基础上建立了灵敏、特异的玉米内州萎蔫病菌双单抗DAS-ELISA检测方法。

关 键 词:玉米内州萎蔫病菌   单克隆抗体   ELISA
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