无色杆菌蛋白酶Ⅰ突变体的结构与稳定性研究 |
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作者姓名: | 张红缨 张今 李绍良 崎山文夫 |
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作者单位: | 吉林大学酶工程国家重点实验室!长春,130023,吉林大学酶工程国家重点实验室!长春,130023,日本大阪大学蛋白质研究所,日本大阪大学蛋白质研究所 |
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摘 要: | 报道了用定住诱变技术,改变无色杆菌蛋白酶Ⅰ的酶原加工位点,使其向左或向右移动,导致突变体成熟酶的肽链从N端延长或缩短若干氨基酸残基.所获突变体显示了低于野生酶的活性.突变体的园二色谱和荧光光谱研究表明,它们的结构发生了某些微小的改变.在不同的pH值、温度和不同浓度的SDS和盐酸胍条件下,也表现了低于天然酶的稳定性.在N端延长的突变体中,酶原加工位点越远离天然加工位点的突变体,显示了越低的活性和稳定性.缩短的突变体活性和稳定性最低.这些结果表明,天然成熟酶的N端可能比较靠近酶的活性中心,并参与构成活性中心附近的局部构象由此可见N端区在成熟酶的结构与功能方面的重要作用.
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关 键 词: | 无色杆菌蛋白酶Ⅰ 加工位点 结构 稳定性 |
收稿时间: | 1997-02-20 |
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