红鳍东方鲀干扰素γ基因的原核表达北大核心CSCD |
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引用本文: | 马普,孙赛红,王玉芳,李慧,刘海映,姜志强,仇雪梅,刘洋,张涛,王秀利.红鳍东方鲀干扰素γ基因的原核表达北大核心CSCD[J].生物技术通报,2015(12):174-179. |
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作者姓名: | 马普 孙赛红 王玉芳 李慧 刘海映 姜志强 仇雪梅 刘洋 张涛 王秀利 |
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作者单位: | 1.大连海洋大学水产与生命学院116023;2.大连海洋大学海洋科技与环境学院116023;3.大连天正实业有限公司116011; |
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基金项目: | 国家海洋公益性行业科研专项经费项目(201405003-2);大连市科技计划项目(2014B11NC091) |
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摘 要: | 旨在探究一种简单高效的获取重组红鳍东方鲀IFNγ蛋白的方法。提取红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肾脏组织的总RNA,并以其为模板进行RT-PCR扩增干扰素γ(IFNγ)基因序列。将IFNγ成熟肽序列与表达载体p ET-32a(+)相连,成功构建了重组表达载体PET-32a-IFNγ。将其转化入E.coli BL21(DE3)感受态细胞后获得了重组表达IFNγ的基因工程菌。经IPTG诱导,p ET-32a-IFNγ在BL21中得到了表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测,结果显示红鳍东方鲀IFNγ基因在大肠杆菌中的表达准确,且目的蛋白表达量较高。
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关 键 词: | 红鳍东方鲀 干扰素γ 原核表达 |
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