| myh6蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 梁艳,宋怀婷,李竞超,吴秀山,袁婺洲.myh6蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备[J].激光生物学报,2010,19(5):644-648. |
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| 作者姓名： | 梁艳 宋怀婷 李竞超 吴秀山 袁婺洲 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南,长沙,410081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，湖南省普通高校学科带头人项目 |
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| 摘 要： | 斑马鱼心脏发育模型中，myh6编码是一种促进心室心肌细胞扩张的转录因子。为了进一步研究myh6在心脏发育和心脏疾病发生中的功能，需要获得斑马鱼myh6蛋白并制备其抗体。从斑马鱼心脏组织中提取总RNA，通过反转录得到心脏组织特异表达基因的cDNA，PCR扩增得到myh6部分编码区序列，然后将其连接到pGEx_4T载体上获得原核表达。经酶切及测序鉴定后，转化BL21细菌，并用IPTG诱导表达融合蛋白，谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化，将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，并用Western blotting检测抗体的特异性。结果显示，获得了myh6原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗myh6多克隆抗体，为myh6功能的进一步研究提供了有力的工具。
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| 关 键 词： | myh6 融合蛋白 多克隆抗体 |
Expression, Purification of myh6 Fusion Protein and Preparation of Its Polyclonal Antibody |
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| LIANG Yan,SONG Huai-ting,LI Jing-chao,Wu Xiu-shan,YUAN Wu-zhou.Expression, Purification of myh6 Fusion Protein and Preparation of Its Polyclonal Antibody[J].ACTA Laser Biology Sinica,2010,19(5):644-648. |
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| Authors: | LIANG Yan SONG Huai-ting LI Jing-chao Wu Xiu-shan YUAN Wu-zhou |
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| Institution: | ( The Center for Heart Development, Key Lab of MOE for Development Biology and Protein Chemistry, Hunan Normal University, Changsha 410081, Hunan, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | myh6 |
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