一种新的非病毒基因转移载体及其体外细胞转染活性研究

目的：用低分子量的聚乙亚胺(PEI)有效地进行基因转染，为基因转染在基因治疗中的应用提供一种可靠、廉价、高效的方法。方法：将带有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的真核表达质粒与阳离子聚合物聚乙亚胺(PEI)结合，用肝癌细胞系SMMC7721实验，研究PEI分子量与转染活性以及可能引起的细胞毒性之间的关系；进一步研究在血清存在的情况下，PEG(聚乙二醇8000)、叶酸等物质对PEI介导的转染效率的影响。结果：分子量为600Da的PEI在pH值为6．0时与质粒DNA以1：1的质量比混合，细胞转染效率最高为43．6 /-7．3％，随着分子量的增大，转染活性略有下降；进一步研究发现，在血清存在下，20μM的叶酸和15％的PEG能有效地改善PEI介导的转染活性，使其转染活性提高了13％；用光学相差显微镜检测了PEI潜在的细胞毒性，结果发现分子量为600Da的PEI没有使细胞形态改变或死亡，但是随着分子量的增大，PEI潜在的细胞毒性也相应增大。结论：PEI是一种高效、有用的非病毒载体，能够在培养的哺乳动物细胞中进行基因转移，这对疾病的基因治疗具有潜在的应用价值。

Study on A Novel Non- viral Vector for DNA Delivery and Its Transfection Activity in the Cultured Cell