应用核酸适配子检测细胞因子的新方法-ELONA法 |
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引用本文: | 严馨蕊, 高绪文, 姚立红, 张智清,.应用核酸适配子检测细胞因子的新方法-ELONA法[J].生物工程学报,2004,20(5). |
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作者姓名: | 严馨蕊 高绪文 姚立红 张智清 |
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作者单位: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所基因室,北京,100052 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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摘 要: | 以人肿瘤坏死因子 (Humantumornecrosisfactor,hTNF α)特异性的核酸适配子为检测分子建立了酶联寡聚核苷酸吸附试验 (Enzyme linkedOligonucleotideassay ,ELONA)方法 ,用于hTNF α的检测。通过SELEX(SystematicEvolutionofLigandsbyExponentialEnrichment)方法从随机RNA库中筛选到与hTNF-α特异结合的RNA适配子。根据其序列 ,用体外转录方法合成生物素标记的RNA适配子 ,并对其进行了氨基修饰以增加其稳定性。以hTNF-α的单克隆抗体为捕获分子 ,生物素标记的hTNF-α特异性RNA适配子为检测分子建立了ELONA方法 ,并对这种检测方法的灵敏度、精密度和准确度等进行了分析。同时用ELONA和ELISA方法检测了正常人血清中的hTNF-α水平 ,并对检测结果进行比较。结果显示 ,ELONA方法的灵敏度为 100pg/mL ,具有较好的精密度和准确度。ELONA法的检测结果与ELISA法检测结果基本一致。该方法适用于血清、细胞培养上清等多种生物标本中各种细胞因子及其它蛋白的检测。
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关 键 词: | SELEX hTNF-α Aptamer ELONA ELISA |
Novel Methods to Detect Cytokines by Enzyme-linked Oligonucleotide Assay |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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