一种自制DNA提取剂在微量细胞和单个囊胚上的应用 |
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作者姓名: | 游小燕 范骁琳 何琦琳 刘雪芹 |
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作者单位: | 重庆市畜牧科学院,重庆,402460;农业部养猪科学重点实验室,重庆,402460;养猪科学重庆市市级重点实验室,重庆,402460;重庆市畜牧科学院,重庆,402460 |
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基金项目: | 重庆市基本科研业务费专项 |
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摘 要: | 目前微量DNA的提取方法,不仅操作繁琐耗时,而且所需试剂价格昂贵。为了解决这个问题,本研究旨在开发一种快速、经济的微量DNA提取剂。用自制提取剂快速提取50个、100个、500个、5 000个、50 000个猪胎儿成纤维细胞的基因组DNA。经PCR扩增,电泳结果显示:自制提取剂可有效提取数量低至50个的猪胎儿成纤维细胞。分别采用自制提取剂、酚氯仿以及试剂盒3种方法提取猪单个囊胚基因组DNA,结果显示:酚氯仿方法提取的单个囊胚基因组DNA,经PCR扩增后,并没有检测到目的条带;而自制提取剂提取模板DNA,能直接扩增出清晰的目的条带,与试剂盒扩增效果相当。自制提取剂能够快速、有效地提取少量细胞和单个囊胚的基因组DNA,满足下游分子生物学研究需要,因此,本研究为微量样本基因组DNA提取提供帮助。
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关 键 词: | 基因组DNA 猪胎儿成纤维细胞 单个囊胚 PCR |
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