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中华绒螯蟹胰脂酶基因克隆及表达分析
作者姓名:魏帮鸿  杨志刚  成永旭  杨航  杨筱珍
作者单位:上海海洋大学,农业部淡水水产种质资源重点实验室;农业部鱼类营养与环境生态研究中心;水产科学国家级实验室教学示范中心,上海,201306;上海海洋大学,农业部淡水水产种质资源重点实验室;农业部鱼类营养与环境生态研究中心;水产科学国家级实验室教学示范中心,上海,201306;上海海洋大学,农业部淡水水产种质资源重点实验室;农业部鱼类营养与环境生态研究中心;水产科学国家级实验室教学示范中心,上海,201306;上海海洋大学,农业部淡水水产种质资源重点实验室;农业部鱼类营养与环境生态研究中心;水产科学国家级实验室教学示范中心,上海,201306;上海海洋大学,农业部淡水水产种质资源重点实验室;农业部鱼类营养与环境生态研究中心;水产科学国家级实验室教学示范中心,上海,201306
基金项目:国家自然科学基金;现代农业产业技术体系建设专项
摘    要:采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆获得了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)胰脂酶基因(pancreatic lipase, PL)的cDNA序列全长。该序列全长1 970 bp,开放阅读框长度为1 374 bp,编码457个氨基酸,5'和3'非编码区(UTR)长度分别为372 bp和224 bp。理化分析表明其预测分子量为51.066 kD,理论等电点为4.65。其序列中检测到脂肪酶典型的催化三联体结构、"盖子"结构以及"亲核弯"结构。蛋白同源性和进化树分析表明,中华绒螯蟹胰脂酶和其他物种同源性较高(50%左右),且和甲壳动物聚为一支而与脊椎动物相聚较远。组织表达模式分析表明,EsPL基因主要在肝胰腺、肠道、胸神经节表达较高;幼体发育阶段表达模式分析表明,EsPL基因在溞状幼体Ⅰ~Ⅲ期表达量逐渐递增,Ⅳ期显著下降,Ⅴ期较Ⅳ又显著增加,大眼幼体阶段表达最低;同一脂肪水平下,相比于含高不饱和脂肪酸的鱼油而言,植物油如豆油和亚麻油的添加均会增加胰脂酶基因的表达,且亚麻油鱼油混合油组促进效果最显著。上述结果表明饵料脂类显著影响中华绒螯蟹胰脂酶,从而为提高中华绒螯蟹对饵料脂类利用率提供了研究依据。

关 键 词:中华绒螯蟹  胰脂酶  基因克隆  组织表达  饵料脂肪源
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