尿黑酸双加氧酶基因工程菌的构建 |
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引用本文: | 肖路梅,杨江科,晁群芳,彭小波,马腾飞.尿黑酸双加氧酶基因工程菌的构建[J].基因组学与应用生物学,2019,38(6):2627-2634. |
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作者姓名: | 肖路梅 杨江科 晁群芳 彭小波 马腾飞 |
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作者单位: | 新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;武汉轻工大学生物工程与制药学院,武汉,430023 |
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摘 要: | 为了构建不同表达类型的尿黑酸双加氧酶(Dio6)基因工程菌,本研究利用Over-lap PCR技术使双加氧酶基因在组成型启动子(P2和P_(spoⅠ-Ⅱ))的控制下表达;利用高效液相色谱(HPLC)技术测定XJ-6、XJ-6+P_(T7)、XJ-6+P2、XJ-6+P_(spoⅠ-Ⅱ)、P_(spoⅠ-Ⅱ)、P2、P_(T7)在7 d对芘的降解。研究结果表明:构建得到3种启动子控制表达的基因工程菌,协同效应研究表明工程菌在XJ-6的协助下可以在含芘的无机盐培养基中生长,并且组成型启动子工程菌的菌数远高于诱导型启动子工程菌的菌数。组成型启动子相较于诱导型启动子工程菌能更稳定表达外源双加氧酶基因,由于诱导型启动子工程菌需要诱导剂IPTG,并且表达双加氧酶基因会受到诱导剂浓度、诱导温度等条件的影响,所以在实际应用中组成型启动子工程菌优于诱导型启动子工程菌。
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关 键 词: | 基因工程菌 组成型启动子 Over-lap PCR 协同效应 HPLC |
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