采用免疫亲和色谱方法从骆驼血清中纯化抗CD47特异性抗体 |
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引用本文: | 李宁娟,合木巴提·卡马勒汗,马晓玲,李江伟.采用免疫亲和色谱方法从骆驼血清中纯化抗CD47特异性抗体[J].基因组学与应用生物学,2019(3). |
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作者姓名: | 李宁娟 合木巴提·卡马勒汗 马晓玲 李江伟 |
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作者单位: | 新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室;新疆生产建设兵团第十二师104团牧一场 |
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摘 要: | 本研究从骆驼血清中制备抗CD47特异性抗体并分析其与重组蛋白CD47和EC9706细胞膜表面CD47结合情况。从骆驼血清中纯化出总Ig G,再利用偶联上CD47的CNBr琼脂糖树脂免疫亲和纯化出抗CD47特异性抗体,通过ELISA和Western blotting验证其结合情况,通过细胞ELISA鉴定抗CD47特异性抗体与食管癌细胞膜表面CD47结合。结果显示通过两步免疫亲和色谱成功获得抗CD47特异性抗体,ELISA和Western blotting说明该抗体与重组蛋白CD47有强的结合活性和特异性,细胞ELISA检测抗CD47抗体浓度在20μg/mL时与EC9706细胞表面CD47有较好的结合。本研究首次利用免疫亲和色谱方法从骆驼血清中获得抗CD47特异性抗体,并与食管癌细胞有一定的结合活性,为肿瘤靶向治疗提供了可能。
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