天津短杆菌T6-13谷氨酸脱氢酶的研究

本文研究了天津短杆菌(Brevibacterium tianjinese)T6-13谷氨酸脱氢酶(GDH)[EC1.4．1．4]的纯化和性质。该酶以辅酶11(NADP)为其专一性辅酶，正、逆反应酶活力最适pH分别为7．5和8．9—9 9，对热较敏感。 该酶对还原型辅酶11(NADPH)、α-酮戊二酸(α-KG)、NH，、NADP和L-谷氨酸(GA)的Km值分别为0．076、3．23、4．0、0．02和120．48 mmol／L。该酶受反应产物的抑制，逆反应受NADPH、α-KG和NH+4的抑制，正反应受NADP和谷氨酸的抑制，但该酶所催化的逆反应既不受三羧酸循环代谢中间产物的抑制，也不受氨基酸的抑制和氨基酸的积累抑制。对发酵过程中谷氨酸脱氢酶活力变化的研究表明，前期酶活力逐渐上升，当发酵至16小时左右酶活力最高，其后酶活力逐渐下降；二级种子的酶活力与发酵过程中酶活力最高时相当。