| 康氏木霉内切葡聚糖酶(EGⅠ)基因的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 黄艳,凌敏,覃拥灵,梁智群.康氏木霉内切葡聚糖酶(EGⅠ)基因的克隆及表达[J].生物技术,2008,18(2):10-13. |
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| 作者姓名： | 黄艳 凌敏 覃拥灵 梁智群 |
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| 作者单位： | 广西大学生命科学与技术学院,广西,南宁,530004 |
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| 摘 要： | 目的：构建纤维素酶EGⅠ原核表达载体,并对表达产物进行初步酶学性质研究。方法：以康氏木霉的总RNA为模板,利用RT-PCR扩增内切葡聚糖酶EGⅠ,重组到T7启动子控制下的质粒pET.His中,构建重组质粒pET.His-EGⅠ,并将其转化至E.coli BL21（DE3）plysS感受态细胞中,经0.4mmol/L的IPTG诱导表达后对其表达产物进行13%SDS-PAGE分析。结果：SDS-PAGE电泳显示EGⅠ在大肠杆菌中得到了与预期目的蛋白相一致的外源蛋白带,分子量约45kDa。初步研究表明：重组蛋白具有内切葡聚糖酶活性,最适pH为6.0,温度在30℃～40℃时酶活稳定,金属离子Mn2＋对酶活力有明显的促进作用。结论：纤维素酶EGⅠ在大肠杆菌中成功表达,具有一定活性。
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| 关 键 词： | 康氏木霉 内切葡聚糖酶 RT-PCR 克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 1004-311X(2008)02-0010-04 |
| 修稿时间： | 2007年12月10 |
Cloning and Expression of Endoglucanase Ⅰ of T.Knoningii |
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| HUANG Yan,LING Min,OIN Yong-ling,LIANG Zhi-qun.Cloning and Expression of Endoglucanase Ⅰ of T.Knoningii[J].Biotechnology,2008,18(2):10-13. |
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| Authors: | HUANG Yan LING Min OIN Yong-ling LIANG Zhi-qun |
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