| 鸡贫血病毒衣壳蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 王晓艳,文刚,高玉龙,高宏雷,王笑梅.鸡贫血病毒衣壳蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备[J].中国病毒学,2006,21(5):477-480. |
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| 作者姓名： | 王晓艳 文刚 高玉龙 高宏雷 王笑梅 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨,150001
2. 哈尔滨工业大学海洋学院,山东威海,264209 |
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| 摘 要： | 利用PCR技术,以pPrpo-VP1为模板扩增得到鸡贫血病毒的衣壳蛋白基因(VP1),以T4多聚核苷酸激酶磷酸化处理、纯化后,克隆至表达载体pET-30a(+) 中,从而构建了原核表达质粒pET30-VP1.将pET30-VP1转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析,可见约45kDa的目的蛋白获得表达.该蛋白经亲和层析纯化后,免疫6-8w的雌性Balb/c鼠,三次免疫后,采血分离血清,制得抗VP1的多克隆血清.以纯化的VP1为包被抗原,用ELISA方法检测,制备的血清效价达12800×以上.以Western blot 检测,该血清可与目的蛋白发生特异性反应,证明其具有良好的免疫原性.VP1蛋白的成功表达及其多克隆抗体的制备为进一步研究VP1蛋白的功能及开展CAV疫苗及诊断制剂的研制奠定了基础.
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| 关 键 词： | 鸡贫血病毒 衣壳蛋白 表达 纯化 多克隆抗体 |
| 文章编号： | 1003-5125(2006)05-0477-04 |
| 修稿时间： | 2006年3月20日 |
Expression and Purification of the Capsid Protein of Chicken Anemia Virus and Preparation of Antibody |
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| WANG Xiao-yan,WEN Gang,GAO Yu-long,GAO Hong-lei,WANG Xiao-mei.Expression and Purification of the Capsid Protein of Chicken Anemia Virus and Preparation of Antibody[J].Virologica Sinica,2006,21(5):477-480. |
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| Authors: | WANG Xiao-yan WEN Gang GAO Yu-long GAO Hong-lei WANG Xiao-mei |
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| Institution: | 1.1.Harbin Veterinary Research Institute, CAAS, Harbin 150001, China2.Harbin Institute of Technology, Weihai 264209, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chicken anemia virus Capsid protein Expression Purification Polyclonal antibody |
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