假单胞菌M18转录调节因子σS基因与无启动子lacZ 基因融合突变株的构建和鉴定 |
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作者姓名: | 葛宜和 许煜泉 |
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作者单位: | 上海交通大学生命科学技术学院 上海 200240;鲁东大学生命科学学院 烟台 264025 |
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摘 要: | 通过菌落原位杂交和Southern 杂交,从假单胞菌M18基因组文库中克隆了rpoS基因及相邻序列。为了深入研究影响rpoS基因表达的调控因素,运用同源重组技术,将无启动子β半乳糖苷酶基因(′lacZ)插入并融合于rpoS基因中,构建了假单胞菌M18 rpoS基因突变株M18SZ。 Miller法测定显示,突变株M18SZ的β-半乳糖苷酶可高达480U,而野生株检测不到β半乳糖苷酶活性。表明,突变株中的rpoS基因与无启动子β-半乳糖苷酶基因已融合并且表达。在KMB培养基中生长量测定(OD600)的结果表明,突变株与野生株生长存在显著差异。
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关 键 词: | 假单胞菌M18;rpoS;lacZ;插入突变;融合;鉴定 |
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