苏云金芽胞杆菌dxr1基因的转录受SigH控制 |
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引用本文: | 李娜,温继龙,宋福平,张杰,段江燕,彭琦.苏云金芽胞杆菌dxr1基因的转录受SigH控制[J].微生物学报,2020,60(1):200-210. |
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作者姓名: | 李娜 温继龙 宋福平 张杰 段江燕 彭琦 |
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作者单位: | 山西师范大学生命科学学院, 山西 临汾 041004;中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193,中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193,中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193,中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193,山西师范大学生命科学学院, 山西 临汾 041004,中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31772243) |
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摘 要: | 【目的】萜类化合物广泛分布在生物界,是重要的生命物质。目前发现有两条萜类化合物的生物合成途径,即甲羟戊酸(MVA)途径和2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)途径。MEP代谢途径中的关键酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构化酶(DXR,EC1.1.1.267)催化1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸生成MEP。枯草芽胞杆菌中dxr基因编码DXR酶,而在苏云金芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)中有2个基因(dxr1和dxr2)编码DXR酶。通过分析BtHD73菌株的dxr1基因的转录活性和dxr1突变体表型,明确dxr1基因的转录调控机制和功能。【方法】通过5?RACE分析dxr1的转录起始位点;β-半乳糖苷酶活性测定分析dxr1基因启动子(Pdxr1)的转录活性;采用同源重组技术分别敲除BtHD73菌株的dxr1和dxr2基因;利用总蛋白定量确定Cry1Ac蛋白产量;利用DXR检测试剂盒检测Bt菌株的DXR活性。【结果】dxr1基因的转录起始位点位于起始密码子上游39 bp处的G碱基;与出发菌株HD73相比,Pdxr1在sig H突变体中的转录活性明显降低;dxr1或dxr2基因的缺失对菌体生长、芽胞形成率和Cry1Ac蛋白产量无显著影响,但使DXR活性下降。【结论】Bt中dxr1基因的转录受Sig H控制,dxr1基因的缺失影响DXR的活性。
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关 键 词: | 苏云金芽胞杆菌 MEP代谢途径 DXR dxr基因 转录调控 |
收稿时间: | 2019/3/26 0:00:00 |
修稿时间: | 2019/4/24 0:00:00 |
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