| OTX1基因慢病毒载体的构建及过表达研究 |
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| 引用本文： | 任萍,王淑艳,关云谦,徐艳玲,张愚.OTX1基因慢病毒载体的构建及过表达研究[J].中国生物工程杂志,2007,27(1):16-21. |
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| 作者姓名： | 任萍 王淑艳 关云谦 徐艳玲 张愚 |
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| 作者单位： | 1. 北京市宣武医院细胞治疗中心2. 首都医科大学宣武医院老年病研究所细胞生物学研究室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;新世纪百千万人才工程资助项目 |
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| 摘 要： | OTX1基因是神经发育调控中关键转录因子之一。本实验构建表达OTX1基因慢病毒载体，探讨慢病毒介导OTX1基因体外过表达的可行性。将OTX1基因克隆到慢病毒穿梭质粒DUET101内，构建表达OTX1以及GFP－OTX1基因的慢病毒载体；将pDUET－OTX1、pDUET－GFP－OTX1及pDUET101（空载体对照）质粒分别与慢病毒包装质粒pCMV R8.91、pMD.G共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞，获得携带OTX1基因、GFP－OTX1基因的重组慢病毒DUET－OTX1、DUET－GFP－OTX1以及仅携带GFP基因的DUET－GFP；用重组慢病毒分别转导293T细胞、SY5Y细胞、小鼠胚胎干细胞及大鼠胚胎15天皮层神经干细胞，证实慢病毒载体能够将外源基因转导入不同细胞，且转导的OTX1或GFP－OTX1在不同细胞中均仅在细胞核内表达；培养OTX1单克隆抗体细胞，浓缩抗体上清，通过Western Blot以及细胞免疫荧光法证实慢病毒介导的OTX1基因及GFP－OTX1基因转导入293T细胞后的过表达。本实验证实慢病毒载体是高效的基因转移载体；OTX1作为发育过程中至关重要的转录因子，经过重组慢病毒体外转导后均只在细胞核内表达。
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| 关 键 词： | 慢病毒 OTX转录因子 基因表达 |
| 收稿时间： | 2006-09-11 |
| 修稿时间： | 2006年9月4日 |
Construction of OTX1 lentiviral vector and overexpression research |
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| REN Ping,WANG Shu-yan,GUAN Yun-qian,XU Yan-ling,ZHANG Yu.Construction of OTX1 lentiviral vector and overexpression research[J].China Biotechnology,2007,27(1):16-21. |
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| Authors: | REN Ping WANG Shu-yan GUAN Yun-qian XU Yan-ling ZHANG Yu |
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