Yunnanese(~Aγδβ)~0-地贫缺失桥片段的克隆及缺失连接区的序列测定 |
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引用本文: | 张俊武,张雪青,赵艳君.Yunnanese(~Aγδβ)~0-地贫缺失桥片段的克隆及缺失连接区的序列测定[J].中国生物化学与分子生物学报,1999,15(1):118-122. |
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作者姓名: | 张俊武 张雪青 赵艳君 |
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作者单位: | 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,中国医学科学院重点项目基金 |
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摘 要: | 为研究导致Yunnanese(Aγδβ)0-地贫缺失事件的分子机制,并从3′并入序列中搜寻增强子类序列,使用EMBL3为载体构建了一例缺失杂合子的基因组文库,筛选到来源于异常染色体11并包含Gγ珠蛋白基因区6.7kb序列以及11.5kb3′并入序列(即缺失桥片段)的克隆.此11.5kb序列在正常染色体中位于β珠蛋白基因约下游66~78kb区域.详细分析了这一区域的限制性内切酶图谱.分析了围绕缺失连接区的DNA序列,精确定位缺失的5′端点发生在Aγ珠蛋白基因上游-116~-117碱基之间.确定缺失的3′端点处于一个L1序列内,位于β珠蛋白基因下游~66kb,距离Chinese(Aγδβ)0-地贫缺失3′端点上游~12.2kb的一个EcoRⅠ位点上游413bp.围绕5′和3′端点的序列之间无明显同源性,说明这一缺失代表了体内的非同源重组事件.这一重组事件可能由L1序列介导.缺失3′端点下游序列的克隆分离也为进一步从中搜寻加强子类序列奠定了基础
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关 键 词: | (~Aγδβ)~0-地中海贫血 缺失连接区 非同源重组 |
收稿时间: | 1999-02-20 |
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