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GST-hDSL重组蛋白的原核表达纯化及对人造血祖细胞的扩增作用
引用本文:林小娟,黄薇薇,赵梅,姜俊芬,郭凌晨,吴明媛,韩伟. GST-hDSL重组蛋白的原核表达纯化及对人造血祖细胞的扩增作用[J]. 现代生物医学进展, 2008, 8(4): 612-616
作者姓名:林小娟  黄薇薇  赵梅  姜俊芬  郭凌晨  吴明媛  韩伟
作者单位:1. 上海交通大学药学院再生医药学研究室;上海交通大学生命科学技术学院,上海,200240
2. 上海交通大学药学院再生医药学研究室
基金项目:上海市科委资助项目 , 上海市浦江人才计划
摘    要:目的:原核表达DSL与谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白并研究观察GST-hDSL对人脐带血CD34 造血祖细胞的体外扩增作用.方法:将人DSL cDNA的蛋白编码序列克隆入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌DH5α中诱导表达融合蛋白,用DEAE阴离子交换柱纯化目的蛋白.然后分离、纯化脐带血CD34 造血祖细胞,不加细胞因子或加入SCF(干细胞生长因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬细胞集落刺激因子,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),经过14天的培养,检测GST-hDSL对细胞总数、CD34 细胞百分率、以及集落形成的影响.结果:当SCF和GM-CSF存在时,GST-hDSL组的CD34 细胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)数以及高增值潜能集落(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)数分别是时照组的1.9、1.2、5.3倍.结论:当与SCF和GM-CSF联合作用时,重组GST-hDSL蛋白对造血祖细胞具有扩增作用.

关 键 词:GST-hDSL  Notch通路  造血祖细胞  重组蛋白  原核  表达纯化  造血祖细胞  扩增作用  Progenitor Cells  Human  Expansion  Effects  Fusion Protein  Purification  联合作用  high  potential  潜能  高增值  forming  cells  存在  结果

Expression and Purification of GST-hDSL Fusion Protein and Its Effects on the Expansion of Human Hematopoietic Progenitor Cells
LIN Xiao-Juan,HUANG Wei-Wei,ZHAO Mei,JIANG Juan-Fen,GUO Ling-Chen,WU Ming-Yuan,HAN Wei. Expression and Purification of GST-hDSL Fusion Protein and Its Effects on the Expansion of Human Hematopoietic Progenitor Cells[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2008, 8(4): 612-616
Authors:LIN Xiao-Juan  HUANG Wei-Wei  ZHAO Mei  JIANG Juan-Fen  GUO Ling-Chen  WU Ming-Yuan  HAN Wei
Abstract:
Keywords:
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