SHN3多克隆抗体纯化与鉴定 |
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引用本文: | 杨眉,程华,王娇,冯瑞丽,文铁桥.SHN3多克隆抗体纯化与鉴定[J].生物技术,2014(1):51-54. |
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作者姓名: | 杨眉 程华 王娇 冯瑞丽 文铁桥 |
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摘 要: | 目的:利用SHN3免疫特异肽段亲和层析纯化抗SHN3多克隆抗体。方法:将制备多克隆抗体SHN3免疫原片段(99bp)划分为4段互相重叠等长的基因片段(48bp),构建原核表达重组质粒并转化E.coil的BL21(DE3)菌株。IPGT诱导重组蛋白表达,Western blotting筛选并人工合成与抗体免疫结合特异性片段,亲和层析纯化抗体,Western blotting检测纯化结果。结果:成功地筛选到SHN3免疫原特异肽段part-3,以亲和层析的方式纯化多克隆抗体,纯化后免疫特异性提高。结论:亲和层析的方式纯化得到的SHN3多克隆抗体抗体,有效地提高免疫特异性,为后续SHN3蛋白功能研究和应用奠定了基础。
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