| 家蚕肽聚糖识别蛋白L1参与Imd信号通路 |
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| 引用本文： | 张杨,刘霁,杨杰,崔清清,沈中元,吴金美.家蚕肽聚糖识别蛋白L1参与Imd信号通路[J].昆虫学报,2016(2):164-171. |
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| 作者姓名： | 张杨 刘霁 杨杰 崔清清 沈中元 吴金美 |
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| 作者单位： | 1. 江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江,212018;2. 江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,江苏镇江212018 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31272508) |
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| 摘 要： | 【目的】肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRP)作为一个重要的模式识别受体,在家蚕Bombyx mori的先天免疫中发挥重要的作用。本研究主要探讨家蚕PGRP-L1基因的功能及其所参与的免疫信号通路。【方法】本实验通过RT-PCR扩增获得家蚕PGRP-L1基因。利用微生物诱导实验对5龄起蚕分别注射大肠杆菌Escherichia coli、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis和PBS,12 h后取体壁和头部提取RNA,然后采用RT-PCR和凝胶电泳技术测定BmPGRP-L1基因的表达水平;利用RNA干涉实验向5龄起蚕注射PGRP-L1 dsRNA或PBS,6 h后再分别注射3种灭活的微生物或PBS,然后检测家蚕体壁及头部的免疫相关转录因子(Rel,Cactus和Relish)以及家蚕多个抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)基因(攻击素基因Attacin,Moricin和葛佬素基因Gloverin)的表达情况。【结果】微生物诱导实验显示,注射大肠杆菌的实验组比注射PBS的对照组Bm PGRP-L1基因转录水平显著上调,而注射酿酒酵母和枯草芽孢杆菌的实验组Bm PGRP-L1转录水平没有变化。利用RNAi技术成功敲低Bm PGRP-1表达,对Bm PGRP-L1敲低的5龄起蚕注射灭活的微生物,敲低实验组relish因子表达低于正常对照组,相应地抗菌肽基因的表达也有不同程度的下调。【结论】结果提示,BmPGRP-L1基因参与家蚕对革兰氏阴性菌大肠杆菌的免疫响应;Bm PGRP-L1基因在家蚕的体壁和头中参与Imd信号通路。
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| 关 键 词： | 家蚕 先天免疫 肽聚糖识别蛋白 微生物诱导 RNA干扰 |
Peptidoglycan recognition protein L1 is involved in the Imd pathway in the silkworm,Bombyx mori |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bombyx mori innate immunity peptidoglycan recognition protein microbial invasion RNA interference |
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