| 家蚕蚕蛹过敏原CPH30的表达、纯化、免疫学鉴定及B细胞抗原表位预测 |
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| 引用本文： | 胡维,梁志林,王良录,刘志刚. 家蚕蚕蛹过敏原CPH30的表达、纯化、免疫学鉴定及B细胞抗原表位预测[J]. 昆虫学报, 2016, 0(4): 377-381. DOI: 10.16380/j.kcxb.2016.04.002 |
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| 作者姓名： | 胡维 梁志林 王良录 刘志刚 |
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| 作者单位： | 1. 深圳大学生命与海洋科学学院,广东深圳518060;深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳518060;2. 深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳,518060;3. 北京协和医院变态反应科,北京,100730 |
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| 基金项目： | 国家卫生部公益性行业科研专项(2015SQ00136)，广东省工程技术研究开发中心项目(2013158925)，广东省对外科技合作项目(2013B051000088)，深圳市科技计划基础研究项目(JCYJ20140828163633991 |
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| 摘 要： | 【目的】克隆、表达纯化出家蚕Bombyx mori蚕蛹过敏原蛋白CPH30(cuticular protein hypothetical 30 precursor),并对其进行免疫学鉴定及B细胞抗原表位预测。【方法】通过蛋白组学方法分析CPH30蛋白的潜在过敏原性,人工化学合成该蛋白基因,将基因连接到p ET-28a载体上,重组质粒转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21,IPTG诱导基因表达。通过镍亲和层析获取高纯度蛋白,用Western blot方法对蛋白进行免疫学鉴定。通过DNAStar软件分析其潜在的B细胞表位。【结果】成功构建出CPH30基因的表达载体;表达纯化出CPH30蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示分子量为25 k Da左右;Western blot结果显示,CPH30蛋白与家蚕过敏患者血清具有Ig E结合性,证明CPH30具有免疫原性;利用DNAStar软件成功分析出氨基酸序列第57-69和150-158位为潜在的B细胞表位。【结论】成功克隆表达出CPH30蛋白,并成功鉴定出其免疫原性,为家蚕蚕蛹过敏反应性疾病的特异性诊断和疫苗治疗奠定理论基础。
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| 关 键 词： | 家蚕 CPH30蛋白 过敏原 免疫学鉴定 B细胞表位 免疫原性 |
Expression,purification, immunological identification and B cell epitope analysis of allergen CPH30 in silkworm (Bombyx mori) pupae |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bombyx mori CPH30 allergen immunological identification B cell epitope immunogenicity |
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