栗精碱对棉铃虫中肠组织可溶型海藻糖酶的抑制效应 |
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引用本文: | 于彩虹,艾东,梁晓贺,王振波,郭建军,姜辉,林荣华. 栗精碱对棉铃虫中肠组织可溶型海藻糖酶的抑制效应[J]. 昆虫学报, 2016, 0(3): 301-308. DOI: 10.16380/j.kcxb.2016.03.006 |
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作者姓名: | 于彩虹 艾东 梁晓贺 王振波 郭建军 姜辉 林荣华 |
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作者单位: | 1. 中国矿业大学(北京)化学与环境工程学院,北京,100091;2. 中国矿业大学(北京)化学与环境工程学院,北京100091;中国农业科学院农业信息研究所,北京100081;3. 山东省龙口市农业技术推广中心,山东龙口,265701;4. 德州市农业科学研究院,山东德州,253015;5. 农业部农药检定所,北京,100125 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31171912 |
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摘 要: | 【目的】研究一种植物源化合物栗精碱对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)5龄幼虫中肠组织可溶型海藻糖酶的活体和离体抑制效果,初步探索其抑制作用。【方法】经过离子交换层析和疏水层析从棉铃虫5龄幼虫中肠组织分离纯化得到可溶型海藻糖酶,通过凝胶过滤层析确定其分子量。分别用不同浓度的抑制剂进行离体和活体抑制研究,得出栗精碱对可溶型海藻糖酶的抑制率和抑制中浓度(IC50),并采用Lineweaver-Burk和Dixon作图法分析抑制类型。【结果】棉铃虫中肠可溶型海藻糖酶比活力为2.022 U/mg,回收率为67.57%,纯化倍数为23.84,分子量约为67 k Da。离体抑制研究表明,3.75,7.5,15和30μmol/L的栗精碱对可溶型海藻糖酶的抑制率分别为42.00%,50.30%,58.32%和67.33%;抑制中浓度(IC50)为7.32μmol/L。通过LineweaverBurk和Dixon作图法,确定栗精碱是棉铃虫中肠组织可溶型海藻糖酶的一种有效的竞争性抑制剂,Ki值为4.9μmol/L。活体抑制研究表明,分别注射浓度为30,15和7.5μmol/L栗精碱10和20 h后,棉铃虫中肠可溶型海藻糖酶活性被显著抑制(P0.05)。相应地,注射后随着时间的延长,血淋巴海藻糖含量连续增加。而注射栗精碱20 h后,血淋巴葡萄糖浓度显著下降,使棉铃虫的能量供给出现障碍。【结论】结果表明,栗精碱是棉铃虫中肠可溶型海藻糖酶的一种有效的抑制剂,可为下一步开发有效的棉铃虫杀虫剂提供理论支持。
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关 键 词: | 棉铃虫 海藻糖 海藻糖酶 抑制剂 栗精碱 Lineweaver-Burk法 |
Inhibitory effects of castanospermine on soluble trehalase from the midgut tissues of Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuiadae) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Helicoverpa armigera trehalose trehalase inhibitor castanospermine Lineweaver-Burk method |
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