中长链聚羟基脂肪酸酯(mcl PHA)在嗜水气单胞菌Ⅰ型PHA合酶缺失突变株中的合成 |
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作者姓名: | 胡风庆 游松 陈国强 |
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作者单位: | 1. 辽宁大学生命科学系,沈阳,110036;沈阳药科大学制药工程学院,沈阳,110016 2. 沈阳药科大学制药工程学院,沈阳,110016 3. 清华大学生物科学与技术系,北京,100084 |
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基金项目: | 国家自然科学杰出青年基金(No.30225001)和国家863高技术研究与发展计划项目基金(No.2002AA213051). |
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摘 要: | 拥有Ⅰ型聚羟基脂肪酸酯(PHA)舍酶基因的嗜水气单胞菌CGMCC 0911株可利用月桂酸而不能利用葡萄糖作为碳源积累PHBHHx。将氯霉素抗性基因(cm)插入到该基因中,获得带有Ⅰ型PHA合酶断裂基因(phaC::Cm)的自杀质粒pFH10。自杀质粒DFH10通过接合作用转入嗜水气单胞菌CGMCC 0911株中并发生体内同源重组,Cm被整合到基因组上,获得Ⅰ型PHA合酶缺失突变株。DNA序列测定证明了这一结果。GC分析表明,突变株不再产生PHBHHx,但却可利用月桂酸或葡萄糖积累中长链PHA,明显表明野生型嗜水气单胞菌基因组中存在另一个编码Ⅱ型PHA合酶的基因,且只有Ⅰ型PHA合酶被钝化后,这个功能被隐藏的Ⅱ型PHA合酶才可在细胞中发挥作用。
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关 键 词: | 嗜水气单胞菌 聚羟基脂肪酸酯(PHA)合酶 中长链PHA 同源重组 |
文章编号: | 1000-3061(2005)04-0524-06 |
修稿时间: | 2005-03-14 |
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