| 大鼠α-酰胺酶在变铅青链霉菌中的克隆及表达研究 |
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| 引用本文： | 武兵元,李元.大鼠α-酰胺酶在变铅青链霉菌中的克隆及表达研究[J].生物工程学报,2000,16(5). |
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| 作者姓名： | 武兵元 李元 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所 北京 100050 |
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| 摘 要： | α-酰胺酶(α-amidase,α-AE)催化神经和内分泌系统中活性多肽的C-端酰胺化，对多肽的生物活性至关重要。以大鼠心房组织的总RNA为模板，采用RT-PCR技术扩增获得编码α-酰胺酶的cDNA，并进行了克隆和测序。为了使α-酰胺酶能在链霉菌中分泌表达，将其cDNA与链霉菌酪氨酸酶(melC1)信号肽的编码序列融合得到融合基因mel/AE，将mel/AE插入链霉菌质粒pIJ680，获得重组质粒pIJ-mel/AE680。SDS-PAGE和生物活性测定证实，携带pIJ-mel/AE680的重组菌株S.lividans TK54［pIJmel/AE680］能分泌表达α-酰胺酶。
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| 关 键 词： | α-酰胺酶，基因克隆表达，变铅青链霉 |
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