马铃薯种薯生产的研究III．马铃薯Y病毒抗血清制备和诊断方法

用0.1 M Tris-Hcl(内含0.05M EDTA)或0．5M PB作提取液，以含0．5M，尿素的0.01 M PB回溶病毒沉淀，以防止病毒凝聚。通过PEG沉淀和反复两次差速离心，提取了由马铃薯“男爵”分离的阿Y分离物。电镜照片表明为形态均一的弯曲眭线状粒体。产量约为2毫克／100克鲜鼋叶片。以PVY—I抗原免疫家兔，用Frd全佐剂进行肌肉注射的方法，制备出PvY-I抗血清，其妓价在2560—5l 20。抗血清和PVx、rMV分离物，以及正常烟草叶片汁液无明显反应。应用PVY_I抗血清冻干剂，用微量凝聚和微量沉淀的方法鉴定马铃薯幼芽和感Y痫毒叶片汁液中的Y病毒，表明具有一定可靠性。由制备的抗血清提取免疫球蛋白致敏乳胶，可测出提纯的PvY抗原最低含量为L．52—2．2微克／毫升，可测出感染烟草叶片汁液的最高稀释度为I：100。制备的抗血清冻干粉和微量凝聚的血清学方法已用于1978和l 979年内蒙古自冶区乌盟后旗无病毒原种场的种薯田间鉴定。