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| 甲状腺转录因子-1融合表达载体的构建及体外活性鉴定 | |
| 引用本文： | 程烽,盛燕,潘春明,陈漪,施静艺,刘智,白雪涛,宋怀东. 甲状腺转录因子-1融合表达载体的构建及体外活性鉴定[J]. 生物技术通讯, 2007, 18(1): 1-4 |
| 作者姓名： | 程烽 盛燕 潘春明 陈漪 施静艺 刘智 白雪涛 宋怀东 |
| 作者单位： | 1. 南京军区,福州总医院全军医学检验中心,福建,福州,350025;上海交通大学,附属瑞金医院人类基因组国家重点实验室,上海血液学研究所,上海,200025 2. 上海交通大学,附属瑞金医院人类基因组国家重点实验室,上海血液学研究所,上海,200025 |
| 摘 要： | 目的:构建人甲状腺转录因子-1(TTF1)编码基因的真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)C-TTF1,并观察其蛋白质体外转录翻译情况。方法:据已知的TTF1基因序列,应用巢式PCR技术,从人肺腺癌细胞株SPC-A1中扩增出TTF1基因,通过TA连接将其克隆入pGEM-T-easy载体,经测序鉴定后,双酶切插入真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His(-)C中;重组质粒经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定后,进行蛋白质体外翻译观察TTF1体外表达情况,用电泳迁移率变动分析(EMSA)验证获得的体外翻译蛋白TTF1是否具有与下游靶基因UGRP1启动子结合的能力。结果:成功构建了含TTF1编码基因的真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)C-TTF1,并能在体外表达TTF1蛋白。结论:能方便地获得TTF1体外翻译蛋白,为进一步研究TTF1蛋白与相应的DNA反应元件及其他转录因子的相互作用奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 甲状腺转录因子-1 真核表达 转录翻译 电泳迁移率变动分析 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）01-0001-04 |
| 修稿时间： | 2006-06-30 |
Contruction and Expression of Eukaryotic Expression Vector pcDNA3.1/myc-His(-)CTTF1 Carrying the Gene Encoding Thyriod Transcription Factor 1 |
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| CHENG Feng,SHENG Yan,PAN Chun-ming,CHEN Yi,SHI Jing-yi,LIU Zhi,BAI Xue-tao,SONG Huai-dong. Contruction and Expression of Eukaryotic Expression Vector pcDNA3.1/myc-His(-)CTTF1 Carrying the Gene Encoding Thyriod Transcription Factor 1[J]. Letters in Biotechnology, 2007, 18(1): 1-4 | |
| Authors: | CHENG Feng SHENG Yan PAN Chun-ming CHEN Yi SHI Jing-yi LIU Zhi BAI Xue-tao SONG Huai-dong |
| Affiliation: | 1. PLA Center for Laboratory Medicine, Fuzhou General Hospital, Nanjin Military Command, Fuzhou 350025; 2. State Key Lab for Medical Genomics, Shanghai Institute of Hematology, Ruijin Hospital, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200025; China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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