| 抗汉坦病毒核蛋白单链抗体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 李建东,王涛,李川,纪燕,梁米芳. 抗汉坦病毒核蛋白单链抗体的构建与表达[J]. 病毒学报, 2003, 19(2): 118-122 |
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| 作者姓名： | 李建东 王涛 李川 纪燕 梁米芳 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防与控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;C03011402; |
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| 摘 要： | 汉坦病毒核蛋白在病毒各个基因组片段核糖核蛋白(RNP)复合物的形成，以及RNP复合物装配入病毒颗粒中发挥重要作用。体外研究表明，核蛋白与病毒RNA的特异性结合结构域位于第175—217个氨基酸残基，羧基端其它部分为非特异性结合结构域。为了在细胞内病毒复制的正常过程中研究核蛋白的功能，应用噬菌体表面呈现技术，分别从鼠杂交瘤细胞和人外周血淋巴细胞天然抗体库中，筛选出两株不同抗原结合位点的抗汉坦病毒核蛋白抗体L13 F3和H34Fab抗体，并在大肠杆菌中进行表达。L13 F3 Fab抗体的抗原结合位点位于核蛋白氨基端25—65个氨基酸之间，H34的抗原结合位点位于核蛋白的羧基端的一半。分别使重链可变区羧基端与轻链可变区氨基端通过9个氨基酸寡肽连接起来，构建成单链抗体，并在大肠杆菌内进行表达。通过酶联免疫吸附试验(EL-SIA)、间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot检测，确定所构建单链抗体与母抗体的抗原结合特性无差别。单链抗体分子量小，易于操作并保留了全部的抗原结合活性，是在细胞内探索汉坦病毒核蛋白功能的良好工具。
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| 关 键 词： | 汉坦病毒 核蛋白 单链抗体 构建 表达 |
| 文章编号： | 1000-8721(2003)02-0118-05 |
Construction and Expression of Anti-Hantavirus N Protein Single Chain Fv Antibody Fragment in Escherichia coli |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hantavirus N protein single chain Fv |
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