| 甜菜坏死黄脉病毒RNA4 cDNA克隆、序列分析及其编码蛋白基因在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 于嘉林,韩成贵,杨莉莉,李大伟,刘仪.甜菜坏死黄脉病毒RNA4 cDNA克隆、序列分析及其编码蛋白基因在大肠杆菌中的表达[J].微生物学报,1997,37(1). |
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| 作者姓名： | 于嘉林 韩成贵 杨莉莉 李大伟 刘仪 |
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| 作者单位： | 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室；中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 北京 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，“863”青年基金资助项目。 |
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| 摘 要： | 以甜菜坏死黄脉病毒(Beet Necrotic Yellow Vein Virus,简称BNYVV)内蒙分离物(NM)RNA为模板,通过反转录和PCR扩增得到了BNYVV RNA4基因组的cDNA克隆pGBF6。序列分析结果表明,pGBF6含有全长RNA4 cDNA插入片段,大小为1465个核苷酸,含有一个849个核苷酸的开放阅读框架,编码产生由282个氨基酸组成的分子量为31kDa的蛋白。与法国F2分离物RNA4相比,其核苷酸序列和由此推导的氨基酸序列同源性分别为97.1％和96.4％,并在5'端非编码区比F2分离物缺失了3个核苷酸。将RNA4编码区cDNA克隆到原核表达载体pFLAG·MAC上,获得融合蛋白表达质粒pFMBF87。所构建的融合蛋白由载体序列编码的14个氨基酸和31kDa蛋白C端的233个氨基酸组成。经IPTG诱导,Westem blotting分析表明,该融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达。本文还对内蒙分离物的株系划分进行了讨论。
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| 关 键 词： | BNYVV RNA4 序列分析 原核表达 Western印迹 |
cDNA CLONING, SEQUENCING AND EXPRESSION OF RNA4 FROM BEET NECROTIC YELLOW VEIN VIRUS |
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| Yu Jialin Han Chenggui Yang Lili Li Dawei Liu Yi.cDNA CLONING, SEQUENCING AND EXPRESSION OF RNA4 FROM BEET NECROTIC YELLOW VEIN VIRUS[J].Acta Microbiologica Sinica,1997,37(1). |
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| Authors: | Yu Jialin Han Chenggui Yang Lili Li Dawei Liu Yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BNYW RNA4 Sequence Prokaryotic expression Western blot |
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