重组人α2b型干扰素的纯化与鉴定 |
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作者姓名: | 周圆 金冬雁 曾庆 李玉英 迟捷 侯云德 |
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作者单位: | 中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室,北京100052 |
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基金项目: | 本工作为国家863高技术研究发展计划生物领域资助项目,已于1992年5月通过专家鉴定 |
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摘 要: | 采用单克隆抗体亲和层析一步纯化法对大肠杆菌表达的重组人a2b型干扰素(IFN-α2b)进行了纯化,然后利用凝胶过滤高压液相层析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和N端25个氨基酸的序列测定等方法对纯化产品进行了鉴定,表明一步纯化的IFN—α2b达到95%以上的纯度,其比活性为2.54×108U/mg但重组IFN—α2b产品N端不均一,含有约30%的去Met分子和约70%的带Met分子。从蛋白质序列的水平上证实,本实验室用定位诱变法构建的IFN—α2b基因在大肠杆菌系统中得到了正确的表达。
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关 键 词: | α2b型干扰素,蛋白质纯化,N端序列分析 |
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