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大肠杆菌MetD运输系统缺失对蛋氨酸积累的影响
引用本文:李华,董伟,李由然,张梁,丁重阳,石贵阳. 大肠杆菌MetD运输系统缺失对蛋氨酸积累的影响[J]. 微生物学通报, 2017, 44(6): 1416-1426
作者姓名:李华  董伟  李由然  张梁  丁重阳  石贵阳
作者单位:1. 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122
基金项目:国家自然科学基金项目(No. 31401674);国家高技术研究发展计划项目(863计划) (No. 2012AA02120101);江南大学自主重点项目(No. JUSRP51503)
摘    要:【目的】构建MetD运输系统缺失突变株,研究该运输系统功能缺失对Escherichia coli W3110蛋氨酸吸收和积累的影响。【方法】通过RT-qPCR比较MetJ阻遏调控解除菌株和野生株E.coli metNIQ表达量的变化,并分析蛋氨酸吸收速度的变化;利用Red同源重组系统分别敲除metNIQ基因簇、metN、metI和metQ,构建MetD运输功能缺失的突变株,研究蛋氨酸吸收速度的变化及对蛋氨酸积累的影响。【结果】MetJ阻遏调控解除后,metNIQ的表达量和蛋氨酸吸收速度显著增加。通过敲除E.coli W3110和Me05的metNIQ,MetD运输系统缺失导致蛋氨酸吸收速度下降。另外,分别敲除用于产蛋氨酸基座菌株Me06的metNIQ基因簇、metN、metI和metQ。生长曲线和摇瓶发酵结果表明,metI的敲除促进菌体的生长和蛋氨酸的合成,蛋氨酸的产量从0.39 g/L提高到0.45 g/L,提高了15.4%,蛋氨酸产率从0.14 g/g DCW提高到0.15 g/g DCW。【结论】E.coli MetD功能的缺失能够降低蛋氨酸的吸收速度,敲除metNIQ基因簇上的metI能够提高蛋氨酸产量。

关 键 词:大肠杆菌,MetJ阻遏蛋白,MetD运输系统,L-蛋氨酸,基因敲除

Effect of inactivating MetD transporter system of Escherichia coli W3110 on L-methionine production
LI Hu,Dong Wei,LI You-Ran,ZHANG Liang,DING Zhong-Yang and SHI Gui-Yang. Effect of inactivating MetD transporter system of Escherichia coli W3110 on L-methionine production[J]. Microbiology China, 2017, 44(6): 1416-1426
Authors:LI Hu  Dong Wei  LI You-Ran  ZHANG Liang  DING Zhong-Yang  SHI Gui-Yang
Affiliation:1. National Engineering Laboratory of Food Fermentation Process and Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. College of Biological Engineering, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China,1. National Engineering Laboratory of Food Fermentation Process and Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. College of Biological Engineering, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China,1. National Engineering Laboratory of Food Fermentation Process and Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. College of Biological Engineering, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China,1. National Engineering Laboratory of Food Fermentation Process and Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. College of Biological Engineering, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China,1. National Engineering Laboratory of Food Fermentation Process and Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. College of Biological Engineering, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China and 1. National Engineering Laboratory of Food Fermentation Process and Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. College of Biological Engineering, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China
Abstract:
Keywords:Escherichia coli W3110   MetJ repressor   MetD transporter   L-methionine   Gene knockout
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