| 柴油降解基因工程菌的构建及降解特性 |
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| 引用本文： | 罗群,何颖,侯登勇,王庆蓉,刘琼,蒋定文,沈先荣.柴油降解基因工程菌的构建及降解特性[J].微生物学通报,2017,44(6):1271-1279. |
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| 作者姓名： | 罗群 何颖 侯登勇 王庆蓉 刘琼 蒋定文 沈先荣 |
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| 作者单位： | 海军医学研究所 上海 200433,海军医学研究所 上海 200433,海军医学研究所 上海 200433,海军医学研究所 上海 200433,海军医学研究所 上海 200433,海军医学研究所 上海 200433,海军医学研究所 上海 200433 |
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| 摘 要： | 【目的】构建柴油降解基因工程菌,提高柴油降解速率,研究p450基因在柴油降解过程中的作用。【方法】将Alcanivorax borkumensis SK2的p450基因合成后,连接至烷烃响应表达载体p Com8中,构建该基因的表达载体p450-SK2/p Com8,并将其转入大肠杆菌DH5α中,通过SDS-PAGE检测该基因在大肠杆菌DH5α中的表达,并将重组质粒p450-SK2/p Com8转入柴油降解菌Acinetobacter sp.Y9中,构建基因工程菌p450-SK2/Y9,研究工程菌p450-SK2/Y9对柴油的降解特性及p450基因在构建的工程菌p450-SK2/Y9中的表达。【结果】PCR、酶切及测序结果表明重组质粒p450-SK2/p Com8构建正确。当柴油诱导浓度大于1%时,目的基因在大肠杆菌DH5α中的蛋白表达量较大,且随着诱导时间的延长而呈增加趋势。通过PCR检测构建的基因工程菌p450-SK2/Y9中的p450基因表明,工程菌构建正确,利用单菌株降解柴油时,宿主菌Y9与工程菌p450-SK2/Y9的柴油降解效率未见明显差异,但工程菌p450-SK2/Y9在构建的菌群中对柴油降解的促进效果明显。SDS-PAGE结果表明,p450基因在构建的工程菌p450-SK2/Y9中能得到准确表达,在混合菌中的表达量高于单菌株。【结论】柴油降解基因工程菌在混合菌群中对柴油降解具有促进作用,而在单菌株情况下未见促进作用,且p450基因的蛋白表达在混合菌中也高于单菌株,这对于提高柴油的降解速率及研究p450基因在柴油降解过程中的作用机理具有一定意义。
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| 关 键 词： | 柴油，降解，基因工程菌，蛋白表达 |
Construction and characterization of engineered diesel-degrading bacterium |
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| LUO Qun,HE Ying,HOU Deng-Yong,WANG Qing-Rong,LIU Qiong,JIANG Ding-Wen and SHEN Xian-Rong.Construction and characterization of engineered diesel-degrading bacterium[J].Microbiology,2017,44(6):1271-1279. |
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| Authors: | LUO Qun HE Ying HOU Deng-Yong WANG Qing-Rong LIU Qiong JIANG Ding-Wen and SHEN Xian-Rong |
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| Institution: | Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China,Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China,Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China,Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China,Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China,Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China and Naval Medical Research Institute, Shanghai 200433, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Diesel Biodegradation Engineering bacterium Protein expression |
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