| pEGFP-植酸酶基因质粒重组构建及其在COS7细胞中表达分析 |
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| 引用本文： | 刘芳,刘臻,成嘉,符贵红,王欢,黄颖,张建社.pEGFP-植酸酶基因质粒重组构建及其在COS7细胞中表达分析[J].激光生物学报,2006,15(6):618-623. |
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| 作者姓名： | 刘芳 刘臻 成嘉 符贵红 王欢 黄颖 张建社 |
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| 作者单位： | 1. 长沙大学生物工程与环境科学系,湖南,长沙,410003
2. 湖南农业大学动物科技学院,湖南,长沙,410128 |
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| 基金项目： | 湖南省科技厅计划项目(05FS3023)，长沙市科技重点项目(K05112-72) |
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| 摘 要： | 采用PCR技术扩增细菌酸性植酸aPPA2基因ORF序列,其DNA分子为1 299 bp,编码432氨基酸,蛋白质分子量约为48 kD a。此植酸酶基因被克隆到pEGFP-N3表达载体的BamH1和Pst1克隆区域,重组的pEG-FP-aPPA2重组质粒经转化到哺乳类培养细胞COS7中。重组的pEGFP-N3-aPPA2在COS7细胞中正常表达并检测出高的植酸酶活性。本研究提出的pEGFP-N3-aPPA2重组质粒构建和在哺乳类COS7细胞表达体系为植酸酶生产提供了新的技术线路。
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| 关 键 词： | 植酸酶 基因重组 酶活性 pEGFP-aPPA2 COS7细胞 |
| 文章编号： | 1007-7146(2006)06-0618-06 |
| 收稿时间： | 2006/9/16 |
| 修稿时间： | 2006年9月16日 |
Construction of Bacterial Phytase Gene in pEGFP-N3 Vectors and Its Expression in COS7 Cells |
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| LIU Fang,LIU Zhen,CHENG Jia,FU Gui-hong,WANG Huan,HUANG Ying,ZHANG Jian-she.Construction of Bacterial Phytase Gene in pEGFP-N3 Vectors and Its Expression in COS7 Cells[J].ACTA Laser Biology Sinica,2006,15(6):618-623. |
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| Authors: | LIU Fang LIU Zhen CHENG Jia FU Gui-hong WANG Huan HUANG Ying ZHANG Jian-she |
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| Abstract: | A bacterial phytase cDNA was amplified with regular PCR technique and it contains 1 360 bp encoding 423 amino acids with protein molecular size approximately 48 kD.The cDNA fragment was sub-cloned into pEGFPN3 plasmid DNA at the cloning site of BamH1/Pst1.The recombinant pEGFP-aPPA_2 plasmid DNA were transfected into mammalian COS7 cells.The recombinant plasmid was expressed in the mammalian cells and the fusion proteins exhibited high phytase activity.This study provides a new system to produce phytase with a potential for an application in related industry. |
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| Keywords: | phytase gene recombination enzyme activity pEGFP-aPPA_2 COS7 cells |
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