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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆的构建
引用本文:吕健,孙志,张建武,刘维全,袁世山. 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆的构建[J]. 微生物与感染, 2007, 2(4): 219-227
作者姓名:吕健  孙志  张建武  刘维全  袁世山
作者单位:1. 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室,上海,200232;中国农业大学生物学院.北京,100094
2. 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室,上海,200232
3. 中国农业大学生物学院.北京,100094
基金项目:国家自然科学基金 , 上海市科技兴农科技攻关项目 , 国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:目的 确定"猪高热综合征"的主要病原是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),为探寻高致病性病毒基因组结构和功能、高致病性蓝耳病发病机制,以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定基础。方法 根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分5段扩增了高致病性PRRSV JX143株的全长cDNA,将各cDNA片段克隆到pBlueScriptⅡSK(+)载体中,进而利用重叠区中的单酶切位点将其连接成JX143株的全长cDNA克隆pJX143和含有遗传标记MluⅠ限制性内切酶的基因组全长cDNA克隆pJX143-M。结果全长cDNA克隆经体外合成RNA后转染MA-104细胞,均获得稳定的拯救病毒。通过比较亲本病毒与拯救病毒的病毒滴度、多步生长曲线和利用拯救病毒vJX143进行动物回归试验,结果 发现病毒学及生物学特性没有显著差异。结论 PRRSV的JX143株病毒确实是引起"猪高热综合征"的主要病原;建立了首个高致病性PRRSV的感染性cDNA克隆,证明拯救病毒与亲本病毒生物学特性相同。

关 键 词:感染性克隆  高致病性  动物回归试验
收稿时间:2007-10-16
修稿时间:2007-10-16

Construction of a full-length infectious done of PRRSV from "Porcine High Fever Syndrome"
LV Jian,SUN Zhi,ZHANG Jian-wu,LIU Wei-quan,YUAN Shi-shan. Construction of a full-length infectious done of PRRSV from "Porcine High Fever Syndrome"[J]. Journal of Microbes and Infection, 2007, 2(4): 219-227
Authors:LV Jian  SUN Zhi  ZHANG Jian-wu  LIU Wei-quan  YUAN Shi-shan
Abstract:
Keywords:Porcine reproductive and respiratory syndrome virus   Full length eDNA clone   High-pathogeneity   Regression text
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