| 抗IFITM1 单克隆抗体的制备及检测 |
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| 引用本文： | 刘灏 林智琪 符方勇 周忠信 刘正军. 抗IFITM1 单克隆抗体的制备及检测[J]. 现代生物医学进展, 2014, 14(9): 1606-1610 |
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| 作者姓名： | 刘灏 林智琪 符方勇 周忠信 刘正军 |
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| 作者单位： | 南方医科大学南方医院血管外科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(81172383)；广东省自然科学基金资助博士启动项目(S2011040002946) |
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| 摘 要： | 目的：制备抗干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-induced transmembrane protein 1, IFITM1)的单克隆抗体，为检测IFITM1及进一步研究其在结肠肿瘤发生过程中的作用提供实验基础。方法：以结肠癌患者的癌组织为材料，提取总RNA，以RT-PCR扩增得到IFITM1 cDNA 序列，经ECoRⅠ和HindⅢ双酶切后，克隆入pGEX-4T-3 进行原核表达并纯化得IFITM1-GST；以该融合蛋白免疫BALB/c 小鼠，淋巴细胞杂交瘤法制备单克隆抗体；采用ELISA、Western-blot及免疫组织化学法以制备的抗体检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结果：成功构建了IFITM1 原核表达载体，获得了IFITM1-GST 重组蛋白；制备得到了1 株抗IFITM1 单克隆抗体，腹水ELISA 效价为1:30000，抗体亚类为IgG1，可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结论：获得了1 株可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法的抗IFITM1 单克隆抗体2F-1，为进一步研究IFITM1在结肠肿瘤发生过程中的作用提供了实验基础。
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| 关 键 词： | 干扰素诱导的跨膜蛋白-1；结肠癌；单克隆抗体 |
Preparation and Application ofA Monoclonal AntibodyAgainst IFITM1 |
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| LIU Hao,LIN Zhi-qi,FU Fang-yong,ZHOU Zhong-xin,LIU Zheng-jun. Preparation and Application ofA Monoclonal AntibodyAgainst IFITM1[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2014, 14(9): 1606-1610 |
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| Authors: | LIU Hao LIN Zhi-qi FU Fang-yong ZHOU Zhong-xin LIU Zheng-jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interferon-induced transmembrane protein 1 Colon cancer Monoclonal antibody |
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