| 人乳头瘤病毒16型病毒样颗粒的制备及其免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 魏旻希,李少伟,黄博,沈文通,苏永在,张春华,顾颖,杜海莲,张军,夏宁邵. 人乳头瘤病毒16型病毒样颗粒的制备及其免疫原性研究[J]. 病毒学报, 2009, 25(4): 245-250 |
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| 作者姓名： | 魏旻希 李少伟 黄博 沈文通 苏永在 张春华 顾颖 杜海莲 张军 夏宁邵 |
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| 作者单位： | 厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005;厦门大学,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30600106,30500092);;国家工程中心技术研究建设项目(2005DC105006);;863计划重点项目(2006AA020905) |
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| 摘 要： | 利用PCR技术从HPV16阳性阴道分泌物标本中获得HPV16 L1基因片段,并将其插入表达载体pTO-T7中,构建重组表达质粒pTO-T7-HPV16-L1;以该重组质粒转化大肠杆菌ER2566并表达HPV16 L1蛋白;所表达的HPV16 L1蛋白经过硫酸铵沉淀、离子交换层析和疏水相互作用层析等纯化步骤后,HPV16 L1纯度达到98%以上,并可在体外装配为直径50nm的病毒样颗粒;动物免疫原性研究结果显示,该病毒样颗粒可诱导高滴度的针对HPV16的中和抗体。上述研究结果表明通过大肠杆菌表达系统制备的HPV16病毒样颗粒具有纯度高,与天然病毒颗粒形态高度相似的特点,并具有高度免疫原性,可以应用于HPV16病毒样颗粒的结构功能研究及HPV16疫苗研发等领域。
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| 关 键 词： | 人乳头瘤病毒16型 大肠杆菌表达系统 纯化 病毒样颗粒 免疫原性 |
Production of Human Papillomavirus Type 16 Virus-like Particles and Its Immunogenicity |
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| WEI Min-xi,LI Shao-wei,HUANG Bo,SHEN Wen-tong,SU Yong-zai,ZHANG Chun-hua,GU Ying,DU Hai-lian,ZHANG Jun,XIA Ning-shao. Production of Human Papillomavirus Type 16 Virus-like Particles and Its Immunogenicity[J]. Chinese journal of virology, 2009, 25(4): 245-250 |
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| Authors: | WEI Min-xi LI Shao-wei HUANG Bo SHEN Wen-tong SU Yong-zai ZHANG Chun-hua GU Ying DU Hai-lian ZHANG Jun XIA Ning-shao |
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| Affiliation: | National Institute of Diagnostics and Vaccine Development in Infectious Diseases;Xiamen University;Xiamen 361005;China |
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| Abstract: | HPV16 L1 gene was amplified from HPV16 positive vaginal secretion sample by PCR,and inserted into pTO-T7 to obtain the recombinant expression vector pTO-T7-HPV16-L1.Then,the pTO-T7-HPV16-L1 was transformed into E.coil strain ER2566 and the recombinant protein HPV16 L1 was expressed in soluble form.After purification by ammonium sulfate precipitation,ion-exchange chromatography,and hydrophobic interaction chromatography,the recombinant protein HPV16 L1 had a purity of more than 98%.By removing DTT,purified H... |
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| Keywords: | Human papillomavirus type 16 Escherichia coli expression system Purification Virus-like particle Immunogenicity |
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