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食品中克罗诺杆菌属双重PCR检测试剂盒的评价
引用本文:周杨,万强,蔡芷荷,卢勉飞,吴清平,李健顺.食品中克罗诺杆菌属双重PCR检测试剂盒的评价[J].微生物学通报,2019,46(9):2282-2291.
作者姓名:周杨  万强  蔡芷荷  卢勉飞  吴清平  李健顺
作者单位:1 广东环凯微生物科技有限公司 广东 广州 510663,1 广东环凯微生物科技有限公司 广东 广州 510663,3 广东环凯生物科技有限公司 广东 肇庆 526238,1 广东环凯微生物科技有限公司 广东 广州 510663,2 广东省微生物研究所 广东 广州 510070,3 广东环凯生物科技有限公司 广东 肇庆 526238
基金项目:广东省重大科技专项项目(2015B020230006);广州市科技计划项目(201604016068);国家重点研发计划(2018YFC1604201)
摘    要:【背景】在食品安全领域,克罗诺杆菌属于需要重点监测的致病菌,当前随着分子检测相关技术的不断发展,研制有关食品中克罗诺杆菌简便、高效的检测产品至关重要。【目的】研制克罗诺杆菌检测的双重PCR检测试剂盒并评价其用于食品中克罗诺杆菌检测的实效性。【方法】优化双重PCR反应体系,反应试剂采用冻干工艺,确立了试剂盒组成,并评价其特异性、灵敏度、重复性、保质期等性能指标。【结果】克罗诺杆菌标准菌株和分离菌株均在目标位置出现两条明显条带,非克罗诺杆菌标准菌株和分离菌株均检测为阴性,纯基因组DNA检测灵敏度为2.3×10-1 ng/μL,纯培养菌检验限为3.2×104CFU/mL;对65份食品样品进行克罗诺杆菌检测,该试剂盒检测结果与标准方法检测结果一致性较高;批内、批间检测重复率均为100%,可在42°C环境放置120 h且其检测效力不受影响,4°C保质期可长达12个月。【结论】该试剂盒性能好,检测结果稳定、可靠,适用于食品中克罗诺杆菌的快速检测。

关 键 词:克罗诺杆菌,双重PCR检测试剂盒,性能评价

Evaluation of duplex PCR detection kit for detection of Cronobacter in food samples
ZHOU Yang,WAN Qiang,CAI Zhi-He,LU Mian-Fei,WU Qing-Ping and LI Jian-Shun.Evaluation of duplex PCR detection kit for detection of Cronobacter in food samples[J].Microbiology,2019,46(9):2282-2291.
Authors:ZHOU Yang  WAN Qiang  CAI Zhi-He  LU Mian-Fei  WU Qing-Ping and LI Jian-Shun
Institution:1 Guangdong Huankai Microbial Science and Technology Co. ltd., Guangzhou, Guangdong 510663, China,1 Guangdong Huankai Microbial Science and Technology Co. ltd., Guangzhou, Guangdong 510663, China,3 Guangdong Huankai Biological Science and Technology Co. Ltd., Zhaoqing, Guangdong 526238, China,1 Guangdong Huankai Microbial Science and Technology Co. ltd., Guangzhou, Guangdong 510663, China,2 Guangdong Institute of Microbiology, Guangzhou, Guangdong 510070, China and 3 Guangdong Huankai Biological Science and Technology Co. Ltd., Zhaoqing, Guangdong 526238, China
Abstract:
Keywords:Cronobacter  Duplex PCR detection kit  Performance evaluation
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