| 不同方向内含子对重组CHO细胞中神经生长因子表达的影响 |
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| 引用本文： | 董卫华,李翠萍,杨赟,王天云,王芳. 不同方向内含子对重组CHO细胞中神经生长因子表达的影响[J]. 生物工程学报, 2019, 35(6): 1071-1078 |
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| 作者姓名： | 董卫华 李翠萍 杨赟 王天云 王芳 |
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| 作者单位： | 1 新乡医学院 基础医学院 生物化学与分子生物学教研室，河南 新乡 453003;2 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心，河南 新乡 453003,1 新乡医学院 基础医学院 生物化学与分子生物学教研室，河南 新乡 453003,1 新乡医学院 基础医学院 生物化学与分子生物学教研室，河南 新乡 453003,1 新乡医学院 基础医学院 生物化学与分子生物学教研室，河南 新乡 453003;2 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心，河南 新乡 453003,1 新乡医学院 基础医学院 生物化学与分子生物学教研室，河南 新乡 453003 |
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| 基金项目： | 河南省科技攻关项目 (No. 182102311184)，国家自然科学基金 (No. 81673337) 资助。 |
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| 摘 要： | 为了研究不同方向的嵌合体内含子对重组神经生长因子 (Nerve growth factor，NGF) 基因表达的影响，以人β-珠蛋白第一内含子5?端剪接序列和人免疫球蛋白重链可变区内含子3?端剪接序列组合而成的嵌合体内含子作为研究对象，在NGF基因5?端插入不同方向的嵌合体内含子，构建含不同方向内含子的NGF基因表达载体。转染至CHO细胞后，G418筛选稳定转染的细胞，荧光定量PCR、ELISA和Western blotting检测不同载体NGF基因的表达情况。结果显示内含子可以大幅度提高NGF基因的表达，且正向内含子对NGF基因表达的增强作用无论是在mRNA水平还是在蛋白水平都要高于反向内含子。所以内含子能够提高外源NGF基因的表达，且内含子调控转基因表达具有方向性。
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| 关 键 词： | CHO细胞，基因表达，内含子，神经生长因子 |
| 收稿时间： | 2018-11-11 |
Increasing transgenic expression in recombinant Chinese hamster ovary cells using introns in different directions |
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| Weihua Dong,Cuiping Li,Yun Yang,Tianyun Wang and Fang Wang. Increasing transgenic expression in recombinant Chinese hamster ovary cells using introns in different directions[J]. Chinese journal of biotechnology, 2019, 35(6): 1071-1078 |
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| Authors: | Weihua Dong Cuiping Li Yun Yang Tianyun Wang Fang Wang |
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| Affiliation: | 1 Department of Biochemistry and Molecular Biology, Basic Medical School, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003, Henan, China;2 Molecular Diagnostic and Medical Test Technology Collaborative Innovation Center of Henan Province, Xinxiang 453003, Henan, China,1 Department of Biochemistry and Molecular Biology, Basic Medical School, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003, Henan, China,1 Department of Biochemistry and Molecular Biology, Basic Medical School, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003, Henan, China,1 Department of Biochemistry and Molecular Biology, Basic Medical School, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003, Henan, China;2 Molecular Diagnostic and Medical Test Technology Collaborative Innovation Center of Henan Province, Xinxiang 453003, Henan, China and 1 Department of Biochemistry and Molecular Biology, Basic Medical School, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003, Henan, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chinese hamster ovary cells gene expression intron nerve growth factor |
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