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家蚕ADP/ATP转运酶(BmANT)抑制BmNPV增殖作用机制研究
引用本文:董战旗,蒋亚明,陈鹏,潘敏慧. 家蚕ADP/ATP转运酶(BmANT)抑制BmNPV增殖作用机制研究[J]. 微生物学报, 2019, 59(8): 1474-1483
作者姓名:董战旗  蒋亚明  陈鹏  潘敏慧
作者单位:西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室, 重庆 400716;西南大学农业部蚕桑生物学与遗传育种重点实验室, 重庆 400716,西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室, 重庆 400716;西南大学农业部蚕桑生物学与遗传育种重点实验室, 重庆 400716,西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室, 重庆 400716;西南大学农业部蚕桑生物学与遗传育种重点实验室, 重庆 400716,西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室, 重庆 400716;西南大学农业部蚕桑生物学与遗传育种重点实验室, 重庆 400716
基金项目:国家自然科学基金(31872427);国家蚕桑产业技术体系(CARS-18);中国博士后基金面上项目(2018M633309);重庆市博士后特别资助项目(XmT2018020)
摘    要:【目的】家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)隶属于杆状病毒,需要借助宿主细胞能量代谢进行自身增殖复制。家蚕ADP/ATP转运酶(Bombyx mori ADP/ATP translocase,BmANT)是线粒体转运蛋白,在BmNPV感染条件下和家蚕热休克蛋白60(heatshockprotein60,BmHSP60)具有直接的相互作用。因此,鉴定Bmant基因在BmNPV感染过程中的功能特征,有助于解析杆状病毒劫持宿主细胞因子促进自身增殖复制机制,完善杆状病毒和宿主相互作用网络。【方法】通过结构域预测BmANT蛋白的结构特征,荧光定量PCR分析Bmant基因在BmNPV感染后的变化特征;并过表达BmANT检测其对病毒DNA复制和病毒蛋白表达变化影响;进一步在转录水平分析Bmant和Bmhsp60基因的调控关系;最后通过流式细胞术等技术鉴定Bmant和Bmhsp60基因共同调控BmNPV增殖复制的机制。【结果】SMART软件预测显示BmANT包含3个线粒体载体结构域,BmNPV感染24 h后Bmant基因持续下调表达。过表达Bmant基因能够显著抑制BmNPV DNA的复制和VP39蛋白表达。荧光定量PCR分析显示Bmant和Bmhsp60基因具有相互拮抗作用,能够相互抑制转录。Bmant和Bmhsp60共同过表达分析显示,BmANT和BmHSP60共同作用BmNPV能够抑制病毒的增殖复制。【结论】结果表明,BmANT是一个线粒体载体蛋白,具有显著的抗病毒作用,能够下调Bmhsp60基因表达,并抑制BmNPV增殖复制。

关 键 词:家蚕  家蚕核型多角体病毒  BmANT  BmHSP60  抗病毒
收稿时间:2018-09-20
修稿时间:2019-01-12

Inhibition of BmNPV proliferation by Bombyx mori ADP/ATP transportase (BmANT)
Zhanqi Dong,Yaming Jiang,Peng Chen and Minhui Pan. Inhibition of BmNPV proliferation by Bombyx mori ADP/ATP transportase (BmANT)[J]. Acta microbiologica Sinica, 2019, 59(8): 1474-1483
Authors:Zhanqi Dong  Yaming Jiang  Peng Chen  Minhui Pan
Affiliation:State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China;Key Laboratory of Sericultural Biology and Genetic Breeding, Ministry of Agriculture, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China;Key Laboratory of Sericultural Biology and Genetic Breeding, Ministry of Agriculture, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China;Key Laboratory of Sericultural Biology and Genetic Breeding, Ministry of Agriculture, Southwest University, Chongqing 400716, China and State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China;Key Laboratory of Sericultural Biology and Genetic Breeding, Ministry of Agriculture, Southwest University, Chongqing 400716, China
Abstract:
Keywords:Bombyx mori  BmNPV  BmANT  BmHSP60  antiviral
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