| 基于聚合酶螺旋反应技术快速检测铜绿假单胞菌 |
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| 引用本文： | 朱渊,戴云山,王俊虎,王萍,吕凤霞,顾秋琴. 基于聚合酶螺旋反应技术快速检测铜绿假单胞菌[J]. 微生物学通报, 2019, 46(5): 1246-1256 |
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| 作者姓名： | 朱渊 戴云山 王俊虎 王萍 吕凤霞 顾秋琴 |
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| 作者单位： | 1 泰州市食品药品检验所 江苏 泰州 225300,2 泰州市食品药品监督管理局 江苏 泰州 225300,1 泰州市食品药品检验所 江苏 泰州 225300,1 泰州市食品药品检验所 江苏 泰州 225300,3 南京农业大学食品学院 江苏 南京 210095,1 泰州市食品药品检验所 江苏 泰州 225300 |
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| 基金项目： | 江苏省食品药品监督管理局科研项目(技术类) (20170227)；泰州市科技支撑计划(社会发展) (TS201811) |
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| 摘 要： | 【背景】铜绿假单胞菌是一种重要的水源和食源性致病菌,可引起急性肠道炎、脑膜炎、败血症和皮肤炎症等疾病。加强铜绿假单胞菌的快速检测,对保障食品安全具有重要的意义。【目的】建立聚合酶螺旋反应(Polymerasespiralreaction,PSR)方法快速检测铜绿假单胞菌。【方法】针对铜绿假单胞菌外毒素A调控基因——ETA基因(toxA)设计引物,通过引入加速引物、优化反应条件和筛选颜色指示剂,建立快速检测铜绿假单胞菌的PSR方法,并研究方法的特异性、敏感性和可靠性。【结果】建立的方法在等温65°C条件下,40 min内可完成PSR反应,且可通过钙黄绿素和羟基萘酚蓝直接判读结果。方法特异性强、灵敏度高,最低检出限分别为20 CFU/mL细菌和1.011 5 pg/μL基因组DNA。可视化PSR方法检测包装饮用水来源的分离菌株与传统生化方法检测结果一致。【结论】研究建立的可视化PSR方法为铜绿假单胞菌DNA快速检测提供了一种可行的有效手段。
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| 关 键 词： | 铜绿假单胞菌，聚合酶螺旋反应，等温扩增，DNA快速检测 |
Rapid detection of Pseudomonas aeruginosa by polymerase spiral reaction (PSR) |
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| Affiliation: | 1 Taizhou Institute for Food and Drug Control, Taizhou, Jiangsu 225300, China,2 Taizhou Food and Drug Administration, Taizhou, Jiangsu 225300, China,1 Taizhou Institute for Food and Drug Control, Taizhou, Jiangsu 225300, China,1 Taizhou Institute for Food and Drug Control, Taizhou, Jiangsu 225300, China,3 College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing, Jiangsu 210095, China and 1 Taizhou Institute for Food and Drug Control, Taizhou, Jiangsu 225300, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pseudomonas aeruginosa Polymerase spiral reaction (PSR) isothermal amplification DNA rapid detection |
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