| 大肠杆菌细胞抽提物制备方案的简化与优化 |
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| 引用本文： | 郭新娟,权春善,赵朋超,王丽娜,范圣第. 大肠杆菌细胞抽提物制备方案的简化与优化[J]. 生物工程学报, 2013, 29(4): 532-535 |
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| 作者姓名： | 郭新娟 权春善 赵朋超 王丽娜 范圣第 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院大连化学物理研究所,辽宁大连116023;中国科学院大学,北京100049
2. 大连民族学院生物技术与资源利用国家民委-教育部重点实验室,辽宁大连,116600 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (No. 21152002) 资助。 |
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| 摘 要： | 无细胞蛋白表达系统是一种将目的蛋白在体外进行表达的新技术和新方法,已广泛应用到蛋白质组学、蛋白质结构和功能等领域的研究中。在无细胞蛋白表达系统中,细胞抽提物的制备是关键因素之一。通过对大肠杆菌细胞抽提物制备过程中离心速度、预孵化和透析等参数的考察,利用绿色荧光蛋白作为报告蛋白,可以得到一个细胞抽提物制备的简化方案。采用相对低的转速(12 000×g,10 min),简易空孵化即可制备出活性高的细胞抽提物,用于无细胞体系蛋白表达,其表达的绿色荧光蛋白产量为209μg/mL。与传统的大肠杆菌细胞抽提物S30相比较,新方案将使时间与成本节省62%,产量是传统方法的2.6倍,使无细胞蛋白表达技术的操作快速、高通量的优势更加明显。
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| 关 键 词： | 蛋白质表达 无细胞表达系统 细胞抽提物 大肠杆菌 体外表达 |
| 收稿时间： | 2012-11-16 |
Simplification and optimization of the preparation of Escherichia coli extract for cell-free protein expression |
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| Xinjuan Guo,Chunshan Quan,Pengchao Zhao,Lina Wang and Shengdi Fan. Simplification and optimization of the preparation of Escherichia coli extract for cell-free protein expression[J]. Chinese journal of biotechnology, 2013, 29(4): 532-535 |
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| Authors: | Xinjuan Guo Chunshan Quan Pengchao Zhao Lina Wang Shengdi Fan |
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| Affiliation: | 1 Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Dalian 116023, Liaoning, China; 2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China;3 Key Laboratory of Biotechnology and Resource Utilization, State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education, Dalian Nationalities University, Dalian 116600, Liaoning, China;1 Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Dalian 116023, Liaoning, China; 2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China;1 Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Dalian 116023, Liaoning, China; 2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China;3 Key Laboratory of Biotechnology and Resource Utilization, State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education, Dalian Nationalities University, Dalian 116600, Liaoning, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | protein synthesis cell-free expression system cell extract Escherichia coli in vitro |
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