| 汉坦病毒核壳蛋白重组抗原的制备和基因分型的研究 |
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| 引用本文： | 唐家琪,操敏,王长军,雷万里,魏春宝,叶春燕. 汉坦病毒核壳蛋白重组抗原的制备和基因分型的研究[J]. 中国病毒学, 1999, 14(4) |
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| 作者姓名： | 唐家琪 操敏 王长军 雷万里 魏春宝 叶春燕 |
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| 作者单位： | 南京军区军事医学研究所,南京,210002 |
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| 摘 要： | 根据HFRSV汉滩型(HTN)代表株76-118和汉城型(SEO)代表株R22基因资料,设计了两组引物,用电脑软件分析证明设计符合引物标准.以一组引物克隆全长S基因片段和N端的部分S基因片段,并使它们在T7系统进行融合表达和非融合表达.非融合表达产量虽不及融合表达高,但生物活性好.以非融合表达的两个S基因片段产物作间接ELISA的包被抗原,其工作浓度均达1:10 000.用另一组引物建立了逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),检测我国不同地区由8种主要宿主分离的37个HFRSV毒株,2个阳性标准对照毒株和5个阴性对照标本,并与cELISA法比较,二者阳性检出率分别为100%和84.6%,符合率为84.6%,但前者比后者敏感性高15.4%.对其中20个毒株的PCR扩增产物先后用RsaⅠ和HindⅢ作二级酶切,建立了逆转录-聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)分型法.被定为HTN型的9株,SEO型的8株,余3株未能定型.此20个毒株曾用血清学方法分型,仅11株分型成功,与RT-PCR-RFLP法结果符合.分型成功率RT-PCR-RFLP法比血清法高30%.
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| 关 键 词： | 肾综合征出血热病毒 基因分型 重组抗原 逆转录-聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP) |
Studies on Preparations of Nucleocapsid Protein Recombinant Antigen and Genotyping of Hantaviruses |
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| Tang Jiaqi,Cao Min,Wang Changjun,Lei Wanli,Wei Chunbao,Ye Chunyan. Studies on Preparations of Nucleocapsid Protein Recombinant Antigen and Genotyping of Hantaviruses[J]. Virologica Sinica, 1999, 14(4) |
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| Authors: | Tang Jiaqi Cao Min Wang Changjun Lei Wanli Wei Chunbao Ye Chunyan |
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