CHO细胞高密度流加工艺参数优化

目的]优化细胞接种密度、培养基、细胞培养温度等参数，提高生产细胞株PCSK9蛋白表达滴度。方法]试验分四步进行，(1)探讨几款市售培养基优化组合后对CHO细胞株蛋白表达滴度的影响；(2)探讨10.0×10⁶、15.0×10⁶、50.0×10⁶ cells/mL高密度接种流加过程培养基、降温时间等对CHO细胞蛋白滴度的影响；(3)在(2)实验数据基础上继续优化，通过更换培养基继续探讨高密度流加工艺的可行性；(4)在反应器对实验数据进行工艺验证。结果](1)CHO细胞PCSK9蛋白滴度提升至2.6 g/L,蛋白滴度成倍增长；(2)15.0×10⁶ cells/mL接种，30.0×10⁶ cells/mL降温至34℃,继续优化培养基1^#、2^#配比，蛋白滴度提升至4.5 g/L,反应器工艺验证，细胞生长状态稳定，蛋白滴度突破3.8 g/L;(3)继续筛选市售培养基，成功实现80.0×10⁶ cells/mL高密度流...