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金黄色葡萄球菌LukF-PV基因的原核表达及血清特异性抗体的检测
引用本文:陈吟霜,周帅,杨镒宇,谢永强,钟华敏,黄莲芬,姚淑雯,董慧,周珍文.金黄色葡萄球菌LukF-PV基因的原核表达及血清特异性抗体的检测[J].现代生物医学进展,2015,15(23):4453-4456.
作者姓名:陈吟霜  周帅  杨镒宇  谢永强  钟华敏  黄莲芬  姚淑雯  董慧  周珍文
作者单位:广州医科大学;广州市妇女儿童医疗中心
基金项目:广州市医药科技重点项目(201102A212013)
摘    要:目的:在大肠杆菌中表达金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)LukF-PV基因,纯化重组蛋白并以其为抗原检测儿童SA感染者血清特异性IgG抗体,分析不同部位SA感染患者血清LukF-PV抗体水平。方法:将Luk F-PV克隆至pET-28a(+)载体,IPTG诱导重组蛋白表达、His柱纯化重组蛋白后,用间接ELISA检测儿童SA感染者与健康对照者血清特异性IgG抗体水平。结果:成功表达纯化LukF-PV蛋白,儿童SA感染组与健康对照组血清特异性抗体均值分别为(0.309±0.063)、(0.505±0.261),具有统计学意义(P0.05)。不同部位来源标本的感染者中血液组和扁桃体组抗体OD均值分别为(0.634±0.225)、(0.481±0.264)与健康对照组有显著差异(P0.05),其余各组与健康对照组无显著差异(P0.05)。抗体阳性率统计分析中血液组分别与脑脊液组、扁桃体组、咽拭子组、痰液组有统计学意义(P0.05),其余各组间均无显著差异(P0.05)。结论:LukF-PV成功表达纯化,,儿童SA感染组LukF-PV特异性IgG抗体显著高于健康对照组,其中来源于血液和扁桃体部位的SA感染者抗体水平与健康者有显著差异,尤以血液感染者最显著。

关 键 词:金黄色葡萄球菌LukF-PV  基因克隆  原核表达  血清特异性抗体

Prokaryotic Expression and Detection of Staphylococcal Serum Specific Antibody of LukF-PV Gene
Abstract:
Keywords:Staphylococcal LukF-PV gene  Gene cloning  Prokaryotic expression  The antibody of serum
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