MicroRNA-9过表达载体的构建与鉴定 |
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引用本文: | 张正平,赵勤鹏,黄琳红,王栋琪,许正伟,郭华,昌震,刘团江.MicroRNA-9过表达载体的构建与鉴定[J].现代生物医学进展,2015,15(26):5033-5037. |
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作者姓名: | 张正平 赵勤鹏 黄琳红 王栋琪 许正伟 郭华 昌震 刘团江 |
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作者单位: | 西安交通大学医学院附属红会医院 |
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基金项目: | 西安市红会医院院级科研基金项目(YJ2013013) |
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摘 要: | 目的:MicroRNA(miRNA)是一类对基因表达起着转录后调控的小分子RNA,在正常发育和疾病发生过程中都发挥着重要的功能。其中,miR-9是一个序列高度保守的成员,在神经发育中调节神经干细胞的多种行为,包括分化、迁移等。但是,目前研究发现的miR-9的功能还存在一些相互矛盾和不清楚的地方,因此,我们拟构建miR-9的过表达载体,以便于对miR-9进一步的仔细研究。方法:我们采用分子克隆的常用方法,以pcDNA6.2-GW/miR为基础,构建出pcDNA6.2-GW/miR-9的表达质粒,分别用PCR、酶切和测序的方法验证质粒构建的正确性,并在Hela细胞和NIH3T3细胞中验证该质粒是否可以过表达miR-9小分子。结果:我们成功构建出正确的pc DNA6.2-GW/miR-9表达质粒,并且该质粒无论在人源的Hela细胞还是在小鼠源性的NIH3T3细胞中都可以过表达miR-9小分子。结论:构建了一个在不同种属间通用的miR-9过载体,为我们进一步研究miR-9的功能奠定了基础。
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关 键 词: | microRNA miR-9 过表达载体 pcDNA6.2-GW/miR 载体 |
Construction and Identification of microRNA-9 Overexpression Vector |
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Abstract: | |
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Keywords: | microRNA miR-9 Overexpression plasmid pcDNA6 2-GW/miR plasmid |
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