| PDGF-C 3'UTR区荧光素酶报告基因载体构建 |
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| 引用本文： | 屈亚琦,罗年安王涛,贾林涛董瑞. PDGF-C 3'UTR区荧光素酶报告基因载体构建[J]. 现代生物医学进展, 2015, 15(20): 3801-3804 |
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| 作者姓名： | 屈亚琦 罗年安王涛 贾林涛董瑞 |
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| 作者单位： | 第四军医大学附属唐都医院普通外科;第四军医大学生化实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81001181） |
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| 摘 要： | 目的:构建不同长度包含目的片段的PDGFC 3`UTR双荧光素酶报告基因载体,为进一步研究PDGF-C mRNA的上游miRNA调节做准备。方法:培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,提取腺癌细胞系MDA-MB-231细胞的基因组DNA,以提取的基因组为模板,通过PCR扩增不同长度的PDGFC 3`UTR片段,经胶回收后,将回收的目的片段插入报告基因载体SV40-p GL3中,再经转化将克隆好的载体转入细菌内扩增(先在固体培养基上扩增为菌落,然后再接种进液体细菌培养管中扩增),扩增细菌后进行质粒提取,并进行菌落PCR及双酶切鉴定,最后送公司进行基因序列检测鉴定。结果:成功构建了不同长度目的片段的PDGFC 3`UTR的双荧光素酶报告基因载体。结论:本实验构建了不同长度的PDGF-C mRNA的3’UTR区的双荧光素酶报告基因载体,为进一步研究PDGF-C mRNA的上游miRNA调节打下了基础。
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| 关 键 词： | 载体构建 PDGFC 双荧光素酶报告基因 |
3'UTR of PDGF-C Dual-luciferase Reporter Gene Vector |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vector construction PDGFC Dual luciferase reporter gene |
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