鸡α干扰素在毕赤酵母中的表达及糖基化对其表达的影响 |
| |
引用本文: | 胡颖,熊向华,汪建华,苏昕,张惟材.鸡α干扰素在毕赤酵母中的表达及糖基化对其表达的影响[J].生物技术通讯,2012(5):690-693. |
| |
作者姓名: | 胡颖 熊向华 汪建华 苏昕 张惟材 |
| |
作者单位: | 1. 军事医学科学院 生物工程研究所,北京 100071 2. 沈阳药科大学,辽宁 沈阳 110016 |
| |
摘 要: | 目的:实现鸡α干扰素(ChIFNα)在毕赤酵母GS115中的表达,并考察糖基化对其表达的影响。方法:人工合成按照毕赤酵母偏好密码子优化的ChIFNα基因,克隆至分泌表达载体pPIC9,电转到毕赤酵母GS115中进行表达。利用定点突变对ChIFNα基因序列中4个糖基化位点进行缺失,SDS-PAGE分析N-糖基化对毕赤酵母表达ChIFNα的影响。结果:ChIFNα在GS115中获得了表达,在摇瓶发酵条件下,表达量为35.2 mg/L;构建了缺失1~4个糖基化位点的4个突变体,在GS115中实现了表达,分析表达结果显示,与未突变的ChIFNα对照相比,突变体的糖基化程度和表达量都有大幅度下降。结论:N-糖基化对于毕赤酵母表达ChIFNα具有重要影响,无糖基化的ChIFNα在毕赤酵母中表达量极低。
|
关 键 词: | 鸡α干扰素 定点突变 N-糖基化 毕赤酵母 |
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录! |
|