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耐底物腈水合酶融合子的产酶条件优化
作者姓名:张丽铃  王筱兰
作者单位:1. 江西师范大学生命科学学院 南昌 330022;2. 功能有机小分子教育部重点实验室 南昌 330022
基金项目:江西省科技支撑计划资助项目(2009JX00564)
摘    要:采用正交设计法对耐底物腈水合酶融合子的发酵条件进行优化,以发酵液起始pH,发酵周期,接种量,装料系数作为考察因素,最终确定最佳发酵条件为:起始pH8.0、发酵周期54h、接种量12%、装液系数12%.在此优化条件下融合子腈水合酶的活力达到1100万U/ml,较优化前提高了83.3%.通过响应面法对发酵培养基配方进行优化研究,采用Plackett-Burman法对8个因素进行了筛选,结果表明,葡萄糖、尿素、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾是影响发酵液腈水合酶产量的主效应因子.用最陡爬坡试验及Central composite design设计进一步优化,利用Design-Expert软件进行二次回归分析,得到各因素的最佳浓度为:葡萄糖22.62g/L、尿素9.76g/L、K2HP04 1.22g/L、KH2PO41.268g/L.在此培养基优化配方下融合子腈水合酶的活力达到1280万U/ml,较原配方的酶活提高了16.4%.

关 键 词:腈水合酶  产酶条件  优化  
收稿时间:2012-03-19
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